苦瓜多糖對腦缺血-再灌注損傷的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的：本文旨在研究苦瓜多糖對腦缺血/再灌注后神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用，并探討其可能的分子機(jī)制。為預(yù)防或治療缺血性腦損傷提供新的對策和藥物作用的靶點(diǎn)。
　　方法：采用SD(Sprague-Dawley)大鼠四動脈結(jié)扎全腦缺血模型(4-VO)、線栓法局灶性腦缺血模型(MCAO)，實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分成：假手術(shù)組(sham)、缺血/復(fù)灌對照組(I/R)、給藥組(腹腔注射苦瓜多糖)等。采用試劑盒檢測苦瓜多糖對腦缺血/再灌注損傷引起的SOD、CAT活

2、性和MDA含量的影響；應(yīng)用形態(tài)學(xué)方法(焦油紫染色)觀察苦瓜多糖對海馬CA1區(qū)神經(jīng)元存活的影響，采用2，3，5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色觀察苦瓜多糖對腦梗死面積的影響；免疫沉淀、免疫印跡等方法檢測苦瓜多糖對JNK3和Wnt信號通路的影響。
　　結(jié)果：1.相對于缺血/復(fù)灌對照組，給予苦瓜多糖可以提高SOD、CAT活性，降低MDA的生成量。在全腦缺血模型和局灶性腦缺血模型中，缺血前或缺血后30min腹腔注射苦瓜多糖，都可以提高SO

3、D和CAT的活性并降低MDA的生成量。
　　2.適量濃度的苦瓜多糖對全腦缺血/再灌注神經(jīng)元損傷具有保護(hù)作用。焦油紫染色顯示，給予不同濃度的苦瓜多糖后(50、100、200、300mg/kg)，相對于I/R組，100mg/kg為最適濃度，海馬CA1區(qū)神經(jīng)元死亡率降低76％，缺血前或缺血后30min給藥100mg/kg都有很好的效果。3.適量濃度的苦瓜多糖減少局灶腦缺血/再灌注的腦梗死面積。局灶性腦缺血/再灌注模型中TTC染色顯示，腹

4、腔注射不同濃度的苦瓜多糖后(30、60、100mg/kg)，相對于MCAO組，給藥組腦梗死面積明顯減少，100mg/kg為最適濃度，缺血前或缺血后30min給藥100mg/kg都有明顯的效果。4.適量濃度的苦瓜多糖可抑制JNK3及其下游信號通路的活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在腦缺血/再灌注損傷中，苦瓜多糖(缺血前30min給藥100 mg/kg或缺血后30min給藥200mg/kg)可抑制JNK3的激活，并可抑制下游信號通路中c-Jun的激活及

5、Fas-L的表達(dá)，抑制細(xì)胞色素c的釋放和Casepase3的生成。5.苦瓜多糖可增強(qiáng)Wnt經(jīng)典信號通路的激活。缺血后30min給予200 mg/kg苦瓜多糖，能顯著降低Dkk-1的表達(dá)、增加GSK-3β磷酸化水平、降低β-catenin磷酸化水平。
　　結(jié)論：1.苦瓜多糖可以提高腦缺血/再灌注損傷中的SOD及CAT的活性、降低MDA的含量。2.苦瓜多糖對全缺血性腦損傷中神經(jīng)元的損傷具有保護(hù)作用，這種保護(hù)作用和苦瓜多糖的濃度有關(guān)。3