柑橘莖尖微芽嫁接脫毒技術(shù)研究.pdf

1、本研究選用本地早、溫州蜜柑、紅玉柑的7～8年齡當(dāng)年生新梢莖段為試材，開展了離體誘導(dǎo)培養(yǎng)不定芽、應(yīng)用再生不定芽開展莖尖微芽嫁接等提高莖尖徽芽嫁接成活率的技術(shù)研究和莖尖嫁接成活苗的PCR檢測。主要試驗(yàn)結(jié)果如下:
　　1.通過不同消毒方法對(duì)比試驗(yàn)，篩選出較適宜的消毒方法，有效改善了柑橘莖段離體誘導(dǎo)培養(yǎng)的污染嚴(yán)重的問題。試驗(yàn)結(jié)果表明，炎熱干燥的夏季是半木質(zhì)化莖段最佳的外植體取材時(shí)期，此時(shí)期的莖段外植體表面攜帶的外生菌較少，相同條件的消毒處

2、理后，莖段培養(yǎng)的污染率最低;采用5％次氯酸鈉間隔48 h的兩次消毒方法，能有效降低莖段培養(yǎng)的污染，污染率為22.53％，且材料死亡少，成活率最高達(dá)72.41％。
　　2.應(yīng)用6-BA、IAA、GA33因子3水平的正交試驗(yàn)組合，對(duì)莖段進(jìn)行離體誘導(dǎo)培養(yǎng)試驗(yàn)，結(jié)果表明以6-BA0.5 mg/L、IAA0.05 mg/L和GA30.5 mg/L這一植物生長調(diào)節(jié)劑組合誘導(dǎo)再生芽效果最好。
　　3.對(duì)不同來源的莖尖進(jìn)行微芽嫁接成活對(duì)比試

3、驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)莖段誘導(dǎo)的離體再生芽莖尖的微芽嫁接成活率為73.5％，田間嫩梢接穗的莖尖微芽嫁接成活率為51.6％，前者優(yōu)于后者，兩者之間的影響差異較顯著。田間接穗莖尖的微芽嫁接成活苗的長勢優(yōu)于離體再生芽莖尖嫁接的成活苗，可以考慮7～8月分以田間新生嫩梢取莖尖進(jìn)行微芽嫁接，可有效保證嫁接苗的質(zhì)量;其它幾個(gè)月分則從離體再生嫩梢取莖尖進(jìn)行微芽嫁接，可有效延長嫁接周期。
　　4.根據(jù)柑橘黃龍病病原的核苷酸序列設(shè)計(jì)了PCR引物檢測莖尖微芽嫁接苗的