利用柑橘莖段誘導(dǎo)不定芽改進(jìn)微芽嫁接脫毒技術(shù)的研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了成年態(tài)柑橘莖段離體培養(yǎng)試驗(yàn)，并利用離體培養(yǎng)產(chǎn)生的不定芽進(jìn)行莖尖微芽嫁接，得到了成活苗；同時(shí)對(duì)帶明顯黃化斑駁癥狀和未顯癥狀的母本樹(shù)不同柑橘品種進(jìn)行微芽嫁接，均獲得了成活苗，并對(duì)通過(guò)兩種不同來(lái)源的莖尖嫁接成活的植株進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)檢測(cè)。主要的結(jié)果如下： 1.通過(guò)改進(jìn)的消毒方法，減少了成年態(tài)柑橘莖段離體培養(yǎng)的污染率。試驗(yàn)表明，在炎熱干燥的夏季晴天午后2點(diǎn)左右取半木質(zhì)化莖段作為外植體培養(yǎng)材料，采用間隔2天消毒方法

2、，能夠?qū)⑶o段污染率控制在10％以內(nèi)。 2.通過(guò)對(duì)莖段離體培養(yǎng)，獲得了莖段嫩芽，并且得到了幾個(gè)品種的初代培養(yǎng)配方；對(duì)離體培養(yǎng)得到的嫩芽進(jìn)行微芽嫁接，獲得了成活的植株，成活率相對(duì)于田間的嫩芽都有不同程度的提高，最高的達(dá)到80％。 3.用不同濃度的6-BA對(duì)來(lái)自田間的莖尖進(jìn)行不同時(shí)間的處理，效果存在較大的差別，試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)用0.5mg/L至1.0mg/L的6-BA浸泡莖尖10min對(duì)供試品種成活率有不同程度的提高，最高的可達(dá)60％

3、。 4.用兩種不同濃度的消毒劑不同時(shí)間的處理各個(gè)供試柑橘品種的莖尖，微芽嫁接成活率表現(xiàn)出不同的效果。試驗(yàn)結(jié)果表明，用2％NaClO消毒7min效果較好。 5.根據(jù)黃龍病的病原的核苷酸序列設(shè)計(jì)PCR引物。利用PCR對(duì)帶明顯黃化斑駁癥狀的紅江橙、宮川和通過(guò)莖尖微芽嫁接的成活的紅江橙和宮川嫁接植株進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果帶毒癥狀的植株擴(kuò)增到特異性擴(kuò)增區(qū)帶，而嫁接的植株沒(méi)有特異性區(qū)帶，證明了莖尖微芽嫁接脫除了柑橘黃龍病病原，可以作為無(wú)病毒