泄?jié)峤舛痉綄冃越Y(jié)腸炎大鼠血清IL-1β、IL-10及結(jié)腸粘膜CD14的影響.pdf

1、目的:潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)是一種病因、發(fā)病機理尚不十分清楚的，以直腸、結(jié)腸粘膜及粘膜下層的炎癥和廣泛潰瘍形成為特點的慢性非特異性炎癥性疾病。本病病程長，病變范圍廣，可反復(fù)發(fā)作，治愈難度大，嚴重影響著患者的生活質(zhì)量和身心健康，被世界衛(wèi)生組織列為現(xiàn)代難治病之一。我們以泄?jié)嵘?、解毒祛瘀為大法組方，篩選出經(jīng)驗方泄?jié)峤舛痉?，從多年的臨床經(jīng)驗來看，本方對UC具有良好的療效。我們在前期研究的基礎(chǔ)上，通過建立UC

2、大鼠模型來研究泄?jié)峤舛痉綄C的治療作用及機理，特別是觀察其對UC大鼠血清IL-1β、IL-10及結(jié)腸粘膜CD14的影響，為進一步的臨床研究和用藥提供理論依據(jù)。
　　方法:本實驗選取健康清潔級wistar大鼠40只，體重220-250g，雄性，隨機分為5組，每組8只:空白對照組(BK)、模型組(MK)、磺胺吡啶組(LK)、泄?jié)峤舛痉礁邉┝拷M(GK)、泄?jié)峤舛痉降蛣┝拷M(DK)。采用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇聯(lián)合造模法誘導(dǎo)大鼠潰

3、瘍性結(jié)腸炎動物模型。造模后第3天，BK大鼠正常喂養(yǎng)，MK大鼠每日用生理鹽水灌胃，LK大鼠予柳氮磺胺吡啶(SASP)灌胃，GK、DK分別給予泄?jié)峤舛痉礁邉┝?、低劑量灌胃，持續(xù)治療14天，觀察療效，研究作用機制。實驗通過2個方面研究探討:實驗一，觀察泄?jié)峤舛痉綄冃越Y(jié)腸炎大鼠一般狀態(tài)及結(jié)腸組織病理學的影響，測定大鼠血清IL-1β、IL-10的含量;實驗二，觀察泄?jié)峤舛痉綄冃越Y(jié)腸炎大鼠結(jié)腸黏膜CD14的影響。
　　結(jié)果:
　

4、　1實驗一:泄?jié)峤舛痉綄冃越Y(jié)腸炎大鼠一般狀況、結(jié)腸組織病理學及血清IL-1β、IL-10的影響
　　1.1大鼠的一般狀況及體重的變化
　　與BK比，MK及各治療組大鼠在精神狀態(tài)、毛發(fā)光澤度、進食、體重、大便性狀等一般情況都有不同程度的改變。其中GK大鼠的精神逐漸恢復(fù)正常，毛色光澤，反應(yīng)靈敏，飲食增多，體重、大便等一般情況與BK組相近。
　　BK大鼠體重（340.37±6.56）正常，MK大鼠體重（258.62±6.

5、63）明顯下降，兩組相比差異顯著，有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。GK(313.00±4.69)、DK(290.75±7.61)、LK（292.87±7.58）與MK(258.62±6.63)相比，大鼠體重明顯增加，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。與LK相比，GK大鼠體重明顯增加，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05); DK大鼠差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。GK比DK大鼠體重明顯增加，有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　1.2結(jié)腸大體形態(tài)

6、觀察與結(jié)腸病變?nèi)庋墼u分
　　BK大鼠的結(jié)腸黏膜完整連續(xù)、色澤淡紅、表面光滑，未見充血、水腫、潰瘍等病理改變。MK大鼠結(jié)腸粘膜充血、水腫、糜爛，可見散在潰瘍形成，潰瘍病灶周圍可見黑色壞死組織。GK大鼠結(jié)腸無明顯擴張、增厚，未見充血、水腫，可見潰瘍愈合的瘢痕，其粘膜的恢復(fù)情況好于DK及LK。
　　MK大鼠評分（2.965±0.372）比BK評分（0.362±0.164）顯著增高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。GK(0.885

7、±0.128)、DK(1.647±0.137)、LK（1.589±0.146）與MK組相比，評分明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。與LK比，GK評分顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);DK評分差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。GK比DK評分明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　1.3光鏡下大鼠結(jié)腸黏膜組織形態(tài)
　　MK大鼠光鏡下可見結(jié)腸粘膜不同程度的充血、水腫，有糜爛和潰瘍形成，腺體破壞，結(jié)構(gòu)紊

8、亂，黏膜上皮部分缺失，黏膜下層有以中性粒細胞為主的大量炎性細胞浸潤。經(jīng)治療后GK大鼠的結(jié)腸粘膜完整，腺體排列較規(guī)則，間質(zhì)充血水腫不明顯，局部有少量炎性細胞浸潤，杯狀細胞豐富，其形態(tài)接近于BK，好于DK及LK大鼠。
　　1.4放射免疫法檢測UC大鼠血清IL-1β
　　MK大鼠血清IL-1β含量（0.205±0.009）比BK含量（0.108±0.010）明顯增高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。與MK相比，GK（0.133±

9、0.010）、DK（0.167±0.016）、LK（0.169±0.009）大鼠血清IL-1β含量明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。與LK比，GK含量顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05); DK含量差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。GK比DK含量明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　1.5酶聯(lián)免疫法檢測UC大鼠血清IL-10
　　MK大鼠血清IL-10含量（22.03±2.82）比BK含量（39.

10、24±6.31）明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。與MK相比，GK（37.60±2.55）、DK（30.12±3.38）、LK（28.98±3.90）大鼠血清IL-10含量明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。與LK比，GK含量顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);DK含量差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。GK比DK含量明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　2實驗二:免疫組化法檢測大鼠結(jié)腸粘膜CD

11、14
　　MK大鼠平均光度（0.348±0.056）比BK大鼠（0.078±0.035）顯著增高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。GK（0.162±0.042）、DK（0.246±0.047）、LK（0.236±0.043）與MK組相比，平均光度明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與LK比，GK平均光度顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05); DK平均光度差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。GK比DK平均光度明顯降低，

12、差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　1本實驗采用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇聯(lián)合造模法誘導(dǎo)大鼠UC動物模型是成功的。
　　2泄?jié)峤舛痉綄C炎大鼠有較好的治療作用，能顯著改善UC大鼠的一般情況和結(jié)腸組織形態(tài)，中藥高劑量組療效優(yōu)于中藥低劑量組及柳氮磺胺吡啶組。
　　3泄?jié)峤舛痉娇娠@著降低UC大鼠血清中IL-1β的含量，提高UC大鼠血清中IL-10的含量;泄?jié)峤舛痉綄C大鼠結(jié)腸粘膜中高表達的CD1