PCR在結(jié)核性肛瘺診斷中的運用.pdf

1、目的:本實驗針對臨床懷疑結(jié)核性肛瘺的患者行手術(shù)切除的瘺管,分別使用病理及熒光PCR檢查及抗酸染色檢查,探討結(jié)核桿菌DNA PCR檢查在結(jié)核性肛瘺診療中的應(yīng)用,即針對臨床懷疑結(jié)核性肛瘺的患者,熒光PCR不但可以對病理確診的患者起輔助診斷,而且對病理懷疑及病理上不能診斷的患者可以輔助診斷,提高結(jié)核性肛瘺檢出率,防止漏診。
　　方法:本實驗以臨床懷疑結(jié)核性肛瘺的患者行手術(shù)切除的60例瘺管,臨床懷疑結(jié)核患者分為三組,病理明確診斷20例,病

2、理懷疑結(jié)核20例,病理為炎性瘺管組織,不考慮結(jié)核性肛瘺診斷的20例。標(biāo)本來源于2009.1~2013.6年遵義醫(yī)學(xué)院病理科臨床懷疑結(jié)核性肛瘺瘺管組織,全部瘺管為石蠟包埋。病理明確診斷組其中男10例,女10例,病理表現(xiàn)可見結(jié)核性肉芽腫及結(jié)核結(jié)節(jié),平均年齡(45.23±5.61)歲。病理懷疑結(jié)核組其中男8例,女12例,平均年齡(40.03±4.23)歲,病理表現(xiàn)可見少量壞死,未見明確的結(jié)核性肉芽腫及結(jié)核結(jié)節(jié)。病理未發(fā)現(xiàn)異常組其中男12例,女

3、8例,平均年齡(47.21±3.21)歲,病理表現(xiàn)可見炎性反應(yīng)。針對其石蠟包埋的瘺管組織提取DNA,采用熒光PCR的方法分別檢測結(jié)核分枝桿菌保守的重復(fù)序列IS6110的片段。
　　結(jié)果:1.病理明確診斷20例,熒光PCR檢測陽性19例,陰性1例,抗酸染色檢測陽性12例,陰性8例。病理與熒光PCR比較,熒光PCR出現(xiàn)1例假陰性,兩種方法明顯差異( P<0.05),病理與抗酸染色比較,符合12例,兩種方法無明顯差異(P>0.05)。熒

4、光PCR與抗酸染色比較,熒光檢測率明顯高于抗酸染色,說明熒光PCR靈敏度高于抗酸染色,兩種方法明顯差異(P<0.05)。
　　2.病理懷疑結(jié)核20例,病理懷疑組通過抗結(jié)核治療傷口愈合,無復(fù)發(fā)。熒光 PCR檢測陽性19例,陰性1例,抗酸染色檢測陽性0例,陰性20例。病理與熒光PCR比較,熒光PCR確診19例,假陰性1例,熒光PCR可以有力輔助診斷病理可疑的診斷,兩種方法明顯差異(P<0.05)。病理與抗酸染色比較,符合0例,兩種方法

5、無明顯差異(P>0.05),熒光PCR與抗酸染色比較,熒光檢測率明顯高于抗酸染色,說明熒光PCR靈敏度高于抗酸染色,兩種方法明顯差異(P<0.05)。
　　3.病理未發(fā)現(xiàn)異常的20例,熒光PCR檢測陽性8例,陰性12例,抗酸染色檢測陽性0例,陰性20例。病理與熒光PCR比較,檢測出8例陽性,電話隨訪可知患者行抗結(jié)核治療后傷口愈合,可見熒光PCR可以有效防止漏診,提高結(jié)核性肛瘺的檢測率,但兩種方法明顯差異(P<0.05)。病理與抗酸

6、染色比較,抗酸染色陽性0例,兩種方法無明顯差異(P>0.05),熒光PCR與抗酸染色比較,熒光檢測率明顯高于抗酸染色,說明熒光PCR靈敏度高于抗酸染色,但兩種方法明顯差異(P<0.05)。
　　結(jié)論:1.熒光PCR可以對已病理確診結(jié)核性肛瘺的患者,輔助其結(jié)核性肛瘺的診斷。熒光 PCR尤其可以對病理懷疑及病理不考慮結(jié)核性肛瘺的患者,行輔助結(jié)核性肛瘺的診斷,提高結(jié)核性肛瘺檢測率,防止漏診。
　　2.熒光PCR的敏感性優(yōu)于抗酸染色