川續(xù)斷屬藥用植物親緣關(guān)系研究與川續(xù)斷種質(zhì)資源的綜合評(píng)價(jià).pdf

1、川續(xù)斷屬（Dipsacus Linn.）為多年生草本植物，中國(guó)有9種2變種可作藥用，其中川續(xù)斷（Dipsacus asperoides C. Y. Cheng et T. M. Ai）是《中國(guó)藥典》收錄藥材續(xù)斷的基源植物（“續(xù)斷”為藥材名，“川續(xù)斷”為植物名）。目前，對(duì)川續(xù)斷屬植物親緣關(guān)系研究多側(cè)重于形態(tài)特征，對(duì)一些外形極為相似種難以進(jìn)行有效區(qū)分，而川續(xù)斷的研究多集中于栽培、化學(xué)及藥理等方面，缺乏對(duì)種質(zhì)資源的綜合性研究。本文采用顯微特征

2、、化學(xué)成分及多種分子標(biāo)記較為系統(tǒng)地分析了川續(xù)斷屬藥用植物的親緣關(guān)系，結(jié)合資源分布及藥材質(zhì)量，為篩選新的藥源提供科學(xué)的理論依據(jù)。通過(guò)研究川續(xù)斷不同居群的群落特征及空間分布格局，以期為野生撫育或人工馴化栽培中環(huán)境的選擇提供參考；通過(guò)產(chǎn)量等生長(zhǎng)性狀分析和藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)，為引種及篩選優(yōu)質(zhì)種源奠定基礎(chǔ)；采用ISSR分子標(biāo)記評(píng)價(jià)我國(guó)各地川續(xù)斷種質(zhì)資源的遺傳多樣性，揭示其群體遺傳結(jié)構(gòu)，并結(jié)合藥材的產(chǎn)量和質(zhì)量，為下一步川續(xù)斷的種質(zhì)創(chuàng)新奠定基礎(chǔ)。

3、　　本文以采集到的9種川續(xù)斷屬藥用植物為研究對(duì)象，對(duì)其顯微特征、化學(xué)成分含量、分子標(biāo)記3個(gè)層次的研究表明：（1）根部、莖部及葉片的顯微特征可作為川續(xù)斷屬藥用植物的鑒別依據(jù)，即根部木栓層列數(shù)、導(dǎo)管數(shù)、皮層有無(wú)裂隙、射線及形成層明顯與否；莖部皮層列數(shù)、皮層排列緊密程度、皮層有無(wú)裂隙、射線細(xì)胞明顯與否；葉片維管束數(shù)量多少、草酸鈣簇晶數(shù)量多少、主脈有無(wú)中空、維管束中導(dǎo)管排列情況以及柵欄組織緊密與否；基于顯微特征的數(shù)量分類在大分支上與傳統(tǒng)分類結(jié)果

4、一致。（2）DNA條形碼matK序列在川續(xù)斷屬9種藥用植物中高度保守，不適用于揭示其種間的遺傳差異，trnL-F間隔序列僅能將日本續(xù)斷和深紫續(xù)斷與其他7個(gè)種分開(kāi)，鑒別能力較弱。（3）3種標(biāo)記（ISSR、SCoT、SRAP）的聚類分析結(jié)果與基于形態(tài)特征的傳統(tǒng)經(jīng)典分類具有很好的吻合度，證實(shí)了3種分子標(biāo)記技術(shù)的可靠性，可作為川續(xù)斷屬藥用植物親緣關(guān)系研究和物種資源分類的有效方法。（4）基于川續(xù)斷皂苷VI等6種化學(xué)成分的聚類結(jié)果與傳統(tǒng)的形態(tài)聚類相

5、似度不高，但基于川續(xù)斷皂苷VI和當(dāng)藥苷聚類結(jié)果，除峨眉續(xù)斷外，則與傳統(tǒng)聚類及本文的分子聚類相同，因此，川續(xù)斷屬藥用植物化學(xué)分類的依據(jù)建議以川續(xù)斷皂苷VI和當(dāng)藥苷作為分類指標(biāo)。（5）作為續(xù)斷藥材基源植物的川續(xù)斷，其根中的川續(xù)斷皂苷VI含量并不是最高，但從主成分分析的角度看，川續(xù)斷的綜合質(zhì)量評(píng)價(jià)得分最高，提示通過(guò)主成分聚類分析進(jìn)行續(xù)斷藥源的篩選是可行的。（6）經(jīng)過(guò)產(chǎn)量和質(zhì)量綜合評(píng)價(jià)推薦大頭續(xù)斷可作為備選藥源，3個(gè)野生大頭續(xù)斷居群的遺傳變異主

6、要存在于居群間，各居群內(nèi)存在親緣關(guān)系較近、遺傳基礎(chǔ)較窄的傾向。
　　本文對(duì)我國(guó)川續(xù)斷種質(zhì)資源的生態(tài)環(huán)境、生長(zhǎng)性狀、化學(xué)成分、遺傳差異等多個(gè)角度的研究表明：（1）多個(gè)聚集強(qiáng)度指數(shù)的測(cè)定均顯示川續(xù)斷種群呈集群分布，群落植物大多為草本，分布于路邊及林緣，提示在野生撫育過(guò)程中需充分考慮其群落特征及空間分布特點(diǎn)。（2）不同產(chǎn)地川續(xù)斷資源大部分生長(zhǎng)性狀之間密切相關(guān)，其中反映產(chǎn)量性狀的根總重與地上總重不相關(guān)，與莖粗、分枝數(shù)顯著相關(guān)，與株高等其余

7、7個(gè)生長(zhǎng)性狀指標(biāo)極顯著相關(guān)，提示川續(xù)斷栽培獲高產(chǎn)需注意控制地上部分的生物量。（3）我國(guó)各地野生川續(xù)斷資源根的產(chǎn)量差異極大，提示引種時(shí)應(yīng)重點(diǎn)考察與重量相關(guān)的性狀，尤其是產(chǎn)量性狀。主成分分析結(jié)果顯示分布于重慶和湖北的大部分資源綜合得分較高，可以作為引種或品種選育的首選種源。（4）不同產(chǎn)地續(xù)斷藥材的質(zhì)量差異極大，既便來(lái)源于同一區(qū)域的藥材差異性也極大。（5）我國(guó)66份川續(xù)斷野生種質(zhì)資源的多態(tài)位點(diǎn)百分率為60.13％，從分子水平上說(shuō)明我國(guó)川續(xù)斷具

8、有較高的遺傳多樣性，遺傳變異水平較高，利于川續(xù)斷培育出優(yōu)良品種。（6）從反映群體遺傳多樣性的各個(gè)遺傳參數(shù)來(lái)看，續(xù)斷12個(gè)野生居群的遺傳多樣性較為豐富（PPB=79.17%、Ne=1.2152、H=0.1361和Hsp=0.2213），遺傳變異水平較高，但種內(nèi)居群水平上其遺傳多樣性卻較低；種群間的基因交流已受阻，群體的遺傳分化明顯。
　　綜上所述，3種分子標(biāo)記（ISSR、SCoT與SRAP）與2種化學(xué)成分（川續(xù)斷皂苷VI和當(dāng)藥苷）均