Omi-HtrA2在早產(chǎn)大鼠高氧性肺損傷中的作用.pdf

1、目的：研究Omi/HtrA2在早產(chǎn)大鼠高氧性肺損傷中作用。
　　方法：早產(chǎn)Wistar大鼠48只隨機(jī)分為高氧組和對照組,高氧組吸入95％的高濃度氧建立高氧肺損傷模型,對照組置于同一條件常壓空氣中。在處理后1、3、7d分批斷頸放血處死動物后取肺組織。左肺制作石蠟切片,采用HE染色觀察肺組織病理變化;免疫組織化學(xué)SP法檢測察Omi/HtrA2、X連鎖凋亡抑制蛋(X-linked Inhibitor of Apoptosis Prote

2、in,XIAP)和半胱氨酰天冬氨酸特異性蛋白酶蛋白酶-9(cysteiny aspartate specific protease caspase-9)在各組肺組織的表達(dá);采用TUNEL法評價肺組織細(xì)胞凋亡的情況;新鮮未固定右肺制作冰凍切片,采用間接免疫熒光雙染色法,在激光共聚焦顯微鏡觀察Omi/HtrA2在細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)位。
　　結(jié)果：(1)高氧組的早產(chǎn)鼠可見肺泡炎性改變和肺發(fā)育滯后(2)Omi/HtrA2、XIAP和caspase

3、-9主要表達(dá)于肺組織細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)。在對照組中Omi/HtrA2有少量表達(dá)。高氧損傷后Omi/HtrA2的表達(dá)呈現(xiàn)時間依賴性,于1d時表達(dá)開始增加,3d時明顯增加,7d時表達(dá)最多(平均光密度值:1d5.19±0.39vs6.71±1.40、3d4.60±0.90 vs9.69±0.96、7d5.38±0.46vs12.66±1.17)(3d P<0.05、7d P<0.01);XIAP高氧1d時表達(dá)有所減少,3d時表達(dá)明顯減少,7d表達(dá)最

4、少(平均光密度值:1d6.96±0.70vs5.53±1.06、3d7.18±2.94vs2.70±0.67、7d6.74±1.18 vs1.49±0.32)(3d、7d P<0.01);caspase-9于1d時表達(dá)開始增加,3d時明顯增加,7d時表達(dá)最多(平均光密度值:1d3.58±1.39vs6.55±1.32、3d3.40±1.35vs11.29±2.48、7d3.76±1.71vs16.45±2.49)(1d、3d、7d P<

5、0.01);(3)高氧組3d出現(xiàn)明顯的肺細(xì)胞凋亡,7d凋亡細(xì)胞數(shù)達(dá)最高峰(凋亡指數(shù):1d14.61±2.00vs25.12±2.93、3d14.78±3.18vs44.09±3.26、7d14.63±2.25vs55.45±3.31),差異有顯著性(P<0.01)。(4)與對照組相比,高氧組肺泡上皮細(xì)胞內(nèi)Omi/HtrA2轉(zhuǎn)位率明顯增加(轉(zhuǎn)位率:1d6.35±0.64vs23.00±2.64、3d7.12±0.75vs38.77±2.4