可體內(nèi)降解的交聯(lián)聚乙烯亞胺的合成及其應(yīng)用.pdf

1、本文主要是合成高效低毒的陽離子聚合物基因轉(zhuǎn)染載體。在各種陽離子聚合物中，25kDa分枝狀PEI是迄今為止轉(zhuǎn)染效率最高的陽離子聚合物之一，現(xiàn)已經(jīng)被做為新開發(fā)的基因轉(zhuǎn)染載體的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，但其細(xì)胞毒性較大；而小分子量的PEI通常沒有細(xì)胞毒性，轉(zhuǎn)染效率卻較低。為了提高轉(zhuǎn)染效率和降低細(xì)胞毒性，我們尋找或設(shè)計(jì)合成了一些生理?xiàng)l件下可降解的交聯(lián)劑與無細(xì)胞毒性的小分子量PEI進(jìn)行交聯(lián)，從而合成出102種可體內(nèi)降解的PEI衍生物。首先對(duì)這些聚合物進(jìn)行了水溶性

2、評(píng)價(jià)，然后以HEK293細(xì)胞為受體細(xì)胞，增強(qiáng)綠色熒光蛋白質(zhì)粒(EGFP)為報(bào)告基因?qū)ζ渲心苋苡诘乃木酆衔镞M(jìn)行了細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)，篩選出一些比25kDaPEI轉(zhuǎn)染效率高的新型聚合物。其中有一種聚合物轉(zhuǎn)染效率高達(dá)88％，對(duì)其進(jìn)行分子量測(cè)定，測(cè)得其分子量約為19000。用其它細(xì)胞系對(duì)這種聚合物進(jìn)行評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)其對(duì)幾種細(xì)胞系轉(zhuǎn)染效率都超過了50％。對(duì)NIH 3T3細(xì)胞系，與其它商業(yè)化的轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)在各自最佳轉(zhuǎn)染條件下，這種聚合物的轉(zhuǎn)染效率