基于殼聚糖修飾納米羥基磷灰石基因載體的轉(zhuǎn)染率研究.pdf

1、目的：評估用殼聚糖修飾后納米羥基磷灰石基因載體的分散穩(wěn)定性能和轉(zhuǎn)染率，為提高納米羥基磷灰石基因載體分散穩(wěn)定性能和轉(zhuǎn)染率奠定理論基礎(chǔ)。 方法：1、HA納米顆粒膠體液中加入0.0125％wt的殼聚糖弱酸溶液，以修飾HA納米顆粒；2、測定殼聚糖修飾后的HA納米顆粒溶液pH值，并測定修飾后的HA納米顆粒在不同pH值環(huán)境下的Zeta電位，評估HA表面電荷情況；3、透射電鏡下觀察殼聚糖修飾后HA納米顆粒的形貌及粒徑，用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分

2、光光度計分析修飾后的HA納米顆粒攜帶、保護DNA的能力，及HA-CS/DNA解離的方式；4、用pEGFP-N1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HepG2肝癌細(xì)胞、Hela宮頸癌細(xì)胞和SW620結(jié)腸癌細(xì)胞，評估殼聚糖修飾后的納米HA基因載體轉(zhuǎn)染率。 結(jié)果：經(jīng)過殼聚糖修飾的HA納米顆粒PH值為4.14，在酸性、中性環(huán)境下Zeta電位均為正值，堿性環(huán)境下為負(fù)值，且在中性條件下可有效的結(jié)合DNA；透射電鏡觀察HA和CS納米顆粒平均粒徑約為20～90nm，部分H