IL-23-IL-17炎癥軸在實(shí)驗(yàn)性自身免疫性肝炎中的作用.pdf

1、目的：通過建立實(shí)驗(yàn)性自身免疫性肝炎小鼠模型，觀察外源性IL-23對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性肝炎模型小鼠中IL-17的影響，為進(jìn)一步研究其在發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　方法：采用易感動(dòng)物C57BL/6小鼠，在第1天和第7天分別以新鮮制備的S-100肝抗原0.5ml與等體積的完全佛氏佐劑（CFA）充分乳化后給予腹腔注射，建立自身免疫性肝炎小鼠動(dòng)物模型，對(duì)照組給予同等劑量的生理鹽水和CFA處理。在28天后提取小鼠外周血和肝脾組織，進(jìn)行病理組織學(xué)檢查

2、，免疫熒光法檢測(cè)血清中自身抗體，免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)肝臟組織中IL-17A+細(xì)胞的表達(dá)。從小鼠體內(nèi)提取出脾淋巴細(xì)胞后，隨機(jī)分為空白組、IL-23組、IL-23+抗CD3單抗組，培養(yǎng)72h后，收集細(xì)胞上清液，采用ELISA方法檢測(cè)IL-17在上清液中的表達(dá)水平。提取脾淋巴細(xì)胞中總的RNA，逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，加入引物，通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RT-PCR）技術(shù)測(cè)定小鼠脾淋巴細(xì)胞中IL-17的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：①正常對(duì)照組小鼠肝細(xì)胞

3、形態(tài)正常，模型組小鼠均觀察到肝臟病變，在肝小葉和匯管區(qū)可觀察到不同程度的炎癥反應(yīng)，以淋巴細(xì)胞為主；
　?、谡?duì)照組小鼠的肝細(xì)胞中幾乎沒有IL-17A+細(xì)胞的表達(dá)，而模型組小鼠的肝細(xì)胞中有明顯的IL-17A+細(xì)胞浸潤(rùn)，并且IL-17A+細(xì)胞主要分布于匯管區(qū)和肝小葉區(qū)，并有大量的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)；
　?、劭瞻捉M中，與對(duì)照組相比，模型組培養(yǎng)的淋巴細(xì)胞中IL-17A和IL-17AmRNA水平較高，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.01）；