microRNa-224在大腸癌中的表達(dá)及其功能研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師( 或指導(dǎo)小組) 的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。研究生簽名≥箬鋁彩導(dǎo)師簽 穆二級囂i 豁 彥汐f 號年弓月矽日河北醫(yī)科大

2、學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謂} 等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名≥鉻留彩 導(dǎo)師簽 h ≥ 年1 7 月均E t|中文摘要m i c r o R N A ．2 2 4 在大腸癌中的表達(dá)及其功能研究摘 要目的：通過T a q m a n r e a l t i m eP C R 技

3、術(shù)檢測m i c r o R N A ．2 2 4 ( m i R - 2 2 4 )在大腸癌癌組織、相應(yīng)正常粘膜中的表達(dá)水平，分析其表達(dá)與大腸癌患者臨床病理特征之間的關(guān)系。同時進(jìn)一步應(yīng)用平板克隆形成實驗、M T T 比色分析法以及流式細(xì)胞技術(shù)等方法檢測m i R - 2 2 4 對結(jié)腸癌細(xì)胞增殖、凋亡等過程的影響。探討m i R - 2 2 4 作為腫瘤標(biāo)記物對結(jié)直腸癌的診斷價值，進(jìn)一步闡明m i R - 2 2 4 在腫瘤發(fā)生發(fā)展過

4、程中的生物功能，以便為大腸癌的早期診斷、治療提供理論和實驗依據(jù)。方法：1 收集2 0 1 1 年1 0 月至2 0 1 2 年1 0 月河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院、河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院的5 7 例大腸癌患者腫瘤組織及對應(yīng)無瘤切緣正常粘膜新鮮標(biāo)本。2 應(yīng)用T a q m a n 實時熒光定量P C R 方法檢測癌組織及正常黏膜組織中m i R - 2 2 4 的表達(dá)水平，分析m i R - 2 2 4 的表達(dá)與大腸癌臨床病理特征的關(guān)系。3 選取

5、8 種結(jié)腸癌細(xì)胞株( S W 6 2 0 、S W 4 8 0 、S W l 1 1 6 、H C T l 1 6 、H T 2 9 、D L D l 、L O V O 、C a c o ．2 ) 進(jìn)行培養(yǎng)，在各細(xì)胞株中檢測m i R - 2 2 4的表達(dá)情況，并與正常組織黏膜中的表達(dá)進(jìn)行比較。4 比較m i R - 2 2 4 在結(jié)腸癌細(xì)胞株H C T l l 6 p 5 3 岍細(xì)胞和H C T l l 6 p 5 3 - ／- 細(xì)胞

6、中二者的表達(dá)差異，分析其與p 5 3 基因的關(guān)系。5 在結(jié)腸癌細(xì)胞株H C T l 1 6 細(xì)胞株中轉(zhuǎn)染m i R - 2 2 4 ，將轉(zhuǎn)染m i R - 2 2 4模擬物的作為實驗組，同時設(shè)立對照組( 轉(zhuǎn)染陰性對照試劑) 及空白組，轉(zhuǎn)然后4 8 小時檢測三組細(xì)胞中m i R - 2 2 4 的表達(dá)水平。6 通過平板克隆形成試驗觀察轉(zhuǎn)染m i R - 2 2 4 前后細(xì)胞集落形成情況。轉(zhuǎn)染m i R - 2 2 4 后l d 、2 d