CGRP和NGF對大鼠全腦缺血再灌注腦組織的保護作用及分子機制.pdf

1、前言:臨床上多種疾病可導(dǎo)致腦缺血,而海馬神經(jīng)元的易損性常被當(dāng)作研究腦缺血的主要模型.短暫性腦缺血可出現(xiàn)神經(jīng)元變性、壞死、遲發(fā)性神經(jīng)元死亡和/或凋亡.降鈣素基因相關(guān)肽(Calcitonin Gene-Related Peptide,CGRP)具有強烈的舒張腦血管效應(yīng)和神經(jīng)保護作用.神經(jīng)生長因子(Nerve Growth Factor,NGF)可促進神經(jīng)元生長發(fā)育,參與受損神經(jīng)元的修復(fù).蛋白激酶C(Protein Kinase C,PKC)

2、是一種依賴于磷脂和Ca<'2+>的蛋白激酶,在細(xì)胞凋亡過程中為一重要的參與細(xì)胞活動的物質(zhì).細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶(Extracellular signal regulated kinase,Erk)是MAPK家族成員,通過Ras-Raf-MEK-Erk信號通路的激活促進細(xì)胞增殖,抑制細(xì)胞凋亡.該實驗建立新型的全腦缺血再灌注模型,應(yīng)用組織病理學(xué)、免疫組織化學(xué)、原位雜交等方法檢測腦缺血再灌注后神經(jīng)元凋亡和PKC、Erk、Erk mRNA的表

3、達(dá)以及頸動脈注射CGRP和NGF對上述指標(biāo)的影響.方法:首先取健康的Wistar大鼠30只(體重300-350g),采用改進的頸動脈負(fù)壓分流法制作大鼠全腦缺血再灌注模型.施加實驗因素,分成5組:假手術(shù)組(sham組,n=6),缺血再灌注組(I/R組,n=6),CGRP組(1μg/ml,n=6),NGF組(500U/ml,n=6),CGRP與NGF合用組(C&N組,n=6).肉眼觀察瞳孔顏色的變化;光鏡觀察大腦皮質(zhì)及海馬組織學(xué)變化;免疫組

4、化SABC法檢測大腦皮質(zhì)及海馬PKC、Erk的表達(dá).采用原位雜交方法檢測大腦皮質(zhì)及海馬Erk mRNA的表達(dá).實驗結(jié)果采用SPSS軟件包進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析及處理.結(jié)論:1.全腦缺血再灌注大鼠腦頂葉皮質(zhì)及海馬CA1區(qū)PKC、Erk及ErkmRNA較sham組表達(dá)增加,說明缺血腦組織促進和抑制凋亡的因素并存.2.CGRP下調(diào)缺血再灌注腦組織皮質(zhì)及海馬PKC的表達(dá),上調(diào)Erk及Erk mRNA表達(dá),可能是其保護神經(jīng)元的分子機制之一.3.NGF下