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文檔簡介
1、目的:觀察絞股藍(lán)總皂苷(Gypenoside,GP)對血管性癡呆大鼠海馬神經(jīng)元型一氧化氮合酶(neuronalnitricoxidesynthase,nNOS)及核酸的保護(hù)作用。 觀察GP對全腦缺血再灌注大鼠海馬結(jié)構(gòu)、大腦皮層和紋狀體韻保護(hù)以及海馬結(jié)構(gòu)、大腦皮質(zhì)的即早基因c-jun、c-fos表達(dá)的抑制作用。 方法:采用改良的Pulsinelli4-血管阻斷(4-VO)方法建立大鼠血管性癡呆模型,用免疫組化法研究GP對大
2、鼠海馬nNOS的表達(dá)的影響,并用吖啶橙染色法進(jìn)行GP對血管性癡呆大鼠海馬的DNA和RNA保護(hù)作用的研究。 采用4-血管阻斷(4-VO)方法建立大鼠急性全腦缺血再灌注模型,用吖啶橙染色法觀察GP對不同腦區(qū)DNA和RNA含量變化的影響;用ABC免疫組化方法觀察兩種劑量的GP對不同時(shí)點(diǎn)、不同腦區(qū)JUN、FOS蛋白表達(dá)的影響。 結(jié)果:與對照組比較,血管性癡呆大鼠海馬CA1區(qū)和CA3區(qū)NOS陽性神經(jīng)元數(shù)目明顯減少;而DNA和RNA
3、吖啶橙染色后的熒光強(qiáng)度(反映DNA和RNA含量)明顯減弱,GP給藥組海馬各亞區(qū)的NOS陽性神經(jīng)元神經(jīng)細(xì)胞數(shù)比VD模型組的明顯增多。DNA和RNA吖啶橙染色后的熒光強(qiáng)度強(qiáng)于血管性癡呆模型組,與對照組相似。 與對照組比較,全腦缺血再灌注大鼠各腦區(qū)DNA和RNA吖啶橙染色后的熒光強(qiáng)度(反映DNA和RNA含量)明顯減弱;GP給藥組各腦區(qū)DNA和RNA吖啶橙染色后的熒光強(qiáng)度強(qiáng)于全腦缺血再灌注模型組,與對照組相似。 與對照組比較,模
4、型組JUN、FOS蛋白表達(dá)最高。各組相同腦區(qū)的JUN、FOS蛋白表達(dá)隨著缺血再灌注時(shí)間的延長逐漸減少(再灌注6h>再灌注24h>再灌注72h)。再灌注6h各實(shí)驗(yàn)組的JUN、FOS蛋白表達(dá)結(jié)果是:模型組>GP低劑量給藥組>GP高劑量給藥組。 結(jié)論:GP可明顯增強(qiáng)血管性癡呆大鼠海馬NOS陽性神經(jīng)元的表達(dá),使得NOS神經(jīng)元形態(tài)接近正常、數(shù)目增多;DNA、RNA熒光反應(yīng)強(qiáng)度恢復(fù),接近正常,對DNA和RNA有保護(hù)作用。 GP可明顯
5、減輕缺血再灌注對大鼠海馬、大腦皮層、紋狀體及齒狀回DNA和RNA損傷。 GP可明顯減少缺血再灌注大鼠海馬結(jié)構(gòu)、大腦皮層的JUN蛋白和FOS蛋白表達(dá)。 缺血再灌注6h、24h、72h的各實(shí)驗(yàn)組的大鼠各腦區(qū)的JUN、FOS蛋白表達(dá),呈現(xiàn)逐漸減低趨勢(再灌注6h>再灌注24h>再灌注72h)。 GP對急性全腦缺血模型大鼠的腦損傷的預(yù)防保護(hù)有一定的劑量相關(guān)趨勢,GP高劑量給藥組保護(hù)效果好于GP低劑量給藥組,尤其是對再灌注
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