米諾環(huán)素對腦缺血再灌注大鼠腦保護作用的實驗研究.pdf

1、目的：研究米諾環(huán)素(Minocycline，MC)對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷后谷氨酸水平及代謝型谷氨酸受體1(mGluRl)表達的影響，探討米諾環(huán)素的腦缺血保護作用及可能機制。
　　方法：1.建立大鼠右側大腦中動脈阻斷(middle cerebral arteryocculusion，MCAO)局灶性腦缺血再灌注模型。2.健康雄性SD大鼠(250g±30g)隨機分成假手術組、缺血再灌注組、MC低劑量干預組、MC高劑量干預組，每組

2、42只。每組內(nèi)隨機將6只用于HE染色，6只用于腦梗死面積測定。每組剩余30只大鼠按再灌注不同時點(2h、6h、12h、24h和48h)隨機分為5個亞組(每組n=6)，用于神經(jīng)功能缺損評分及指標檢測。3.造模后采用NSS評分法行神經(jīng)功能評分；采用TTC法測腦梗死面積；HE染色觀察腦組織形態(tài)病理學變化；高效液相色譜法測缺血半暗帶谷氨酸濃度；反轉錄聚合酶鏈反應法(RT-PCR)半定量檢測mGluRl-mRNA的表達水平。
　　結果：1.

3、神經(jīng)功能評分：造模術后，缺血再灌注組及MC干預組均出現(xiàn)一定程度神經(jīng)功能障礙，與缺血再灌注組相比，MC干預組神經(jīng)功能評分降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。2.腦梗死面積測定：與缺血再灌注組相比，MC治療組腦梗死面積減少；差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。3.HE染色假手術組神經(jīng)細胞形態(tài)正常，胞膜胞核清晰，核仁明顯；各時間段均無炎性細胞浸潤，也無梗死灶出現(xiàn)。缺血再灌注組腦組織梗塞灶位于右側額頂葉皮質和紋狀體區(qū)，呈片狀分布。缺血再灌注組

4、缺血半暗帶腦組織結構疏松淡染，水腫有空腔形成，神經(jīng)元胞核碎裂溶解或消失，神經(jīng)元正常結構消失，排列紊亂，數(shù)目減少。與缺血再灌注組比較，MC干預組在再灌注各個時間點的梗塞灶均減小，神經(jīng)組織較致密，結構完整的神經(jīng)元明顯增多，與凋亡細胞交錯存在。4.谷氨酸水平測定：缺血2小時再灌注2小時后腦組織谷氨酸水平開始進行性升高，于再灌注后24小時達到最高點，MC干預組谷氨酸水平在不同時間點均較同一時間點缺血再灌注組降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)

5、。5.RT-PCR：假手術組mGluRl-mRNA呈低水平表達；缺血再灌注組表達增加(P<0.05)；與缺血再灌注組比較，MC干預組mGluRl-mRNA的表達降低，但高于假手術組(P<0.05)。
　　結論：1.米諾環(huán)素可降低缺血再灌注大鼠的神經(jīng)功能評分，縮小缺血再灌注大鼠的腦梗死面積，有神經(jīng)保護作用。2.谷氨酸最高峰為再灌注24h，在腦缺血早期即參與神經(jīng)元損傷作用；米諾環(huán)素可以降低谷氨酸水平，減少mGluRl-mRNA表達。這