靈芝煎劑對(duì)亞稀褶黑菇急性中毒大鼠肝臟保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景:毒蕈中毒是常見(jiàn)臨床急癥之一,其中亞稀褶黑菇中毒是比較常見(jiàn)的一種毒蕈中毒。亞稀褶黑菇,亦名亞黑紅菇、火炭菌、毒黑菇,是同擔(dān)子亞門(mén)層菌綱紅菇科紅菇屬的一種劇毒野生蘑菇,在我國(guó)分布很廣,因此,誤采誤食此種野生蕈中毒事件經(jīng)常發(fā)生。人類(lèi)誤食中毒后臨床癥狀發(fā)作快,迅速引起全身多系統(tǒng)損害,尤其是肝臟和腎臟損害極為明顯,一般在72h內(nèi)死亡,最快者可在6h左右死亡,是毒蘑菇中毒類(lèi)型中最為兇險(xiǎn)的一種,病死率高。目前臨床上尚無(wú)特效解毒劑。靈芝是我國(guó)傳統(tǒng)

2、的名貴中藥材,含有多種有效化學(xué)成分,幾乎對(duì)全身各系統(tǒng)均有調(diào)節(jié)作用。臨床研究發(fā)現(xiàn)靈芝煎劑對(duì)亞稀褶黑菇中毒患者有較好的治療作用,能明顯降低亞稀褶黑菇中毒患者的病死率。
　　 目的:本研究通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)從功能和病理形態(tài)學(xué)角度證實(shí)靈芝煎劑對(duì)于SD大鼠急性亞稀褶黑菇中毒肝臟的保護(hù)作用,為以后其進(jìn)一步的具體的解毒機(jī)制研究和臨床實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。
　　 方法:1.模型制備:用SD雌性大鼠20只,隨機(jī)分為4組:第一組為空白組,采用生理鹽水灌胃

3、；第二組為靈芝組,采用靈芝煎劑灌胃；第三組為模型組Ⅰ,采用亞稀褶黑菇毒素灌胃造模；第四組為模型組Ⅱ,采用亞稀褶黑菇毒素灌胃造模后,再用靈芝煎劑灌胃治療。
　　 2.實(shí)驗(yàn)研究:(1)分組處置:①空白組:每天上午8:00～9:00用生理鹽水4ml灌胃；②靈芝組:每天上午8:00～9:00用靈芝煎劑4ml灌胃?？偗煶虨?天。③模型組Ⅰ:第一天上午8:00～9:00用亞稀褶黑菇毒素按5.0g/Kg+生理鹽水配成4ml液灌胃,以后每天于同

4、一時(shí)間用生理鹽水4ml灌胃；④模型組Ⅱ:第一天上午8:00～9:00用亞稀褶黑菇毒素5.0g/Kg+生理鹽水配成1ml液灌胃,2h后用靈芝液4ml灌胃,以后每天于同一時(shí)間用靈芝煎劑4ml灌胃。(2)觀察大鼠的存活情況,行為積分。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,處死動(dòng)物,心臟取血2ml離心后取血清查肝臟生化指標(biāo)[總膽紅素(STB)、直接膽紅素(SDB)、總膽汁酸(BA)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)]；同時(shí)取肝臟組織福爾馬林液固定,HE染色,光

5、鏡下觀察組織病理改變。
　　 結(jié)果:1.生存情況:模型組Ⅰ于實(shí)驗(yàn)48h以后死亡2只,其余所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。
　　 2.行為表現(xiàn):模型組Ⅰ大鼠機(jī)警性降低,精神萎靡,喜睡,自主活動(dòng)減少,與空白組和靈芝組大鼠比較進(jìn)食量減少。模型組Ⅱ精神狀態(tài)尚好,自主活動(dòng)可,機(jī)警性較高,與模型組Ⅰ比較進(jìn)食量也增加?？瞻捉M和靈芝組行為表現(xiàn)無(wú)差異。
　　 3.肝臟生化指標(biāo)改變:模型組Ⅰ血清STB、SDB、BA、ALT、AST顯著升高,

6、模型組ⅡSTB、SDB、BA、ALT、AST較模型組Ⅰ下降明顯,但和空白組比較,差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。空白組和靈芝組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 4.病理改變:(1)大體肉眼觀察:模型組Ⅰ的大鼠肝臟體積明顯腫大,質(zhì)地變硬,充血,顏色變深。模型組Ⅱ大鼠肝臟體積縮小不明顯,質(zhì)地較硬,充血,顏色較中毒組淺。其余兩組肝臟體積質(zhì)地顏色均正常。(2)光鏡觀察:①空白組:低倍鏡所見(jiàn)肝組織結(jié)構(gòu)清楚,肝細(xì)胞形態(tài)正常,肝竇無(wú)擴(kuò)張,肝小葉結(jié)構(gòu)存在。高倍鏡下

7、所示肝細(xì)胞大小形態(tài)正常,胞漿豐富,細(xì)胞核大小正常,核仁清楚,無(wú)壞死跡象。②靈芝組:低倍鏡所見(jiàn)肝組織結(jié)構(gòu)清楚,肝細(xì)胞形態(tài)規(guī)則,大小一致,肝小葉結(jié)構(gòu)存在。高倍鏡下所示肝細(xì)胞大小形態(tài)正常,胞漿豐富,細(xì)胞核大小正常,核仁清楚,無(wú)壞死跡象。③模型組Ⅰ:低倍鏡所見(jiàn)肝組織結(jié)構(gòu)有明顯破壞,充血,肝細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,大小不一致,濁腫,胞核固縮,肝竇擴(kuò)張,充血,小葉結(jié)構(gòu)破壞。高倍鏡下所示肝細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,大小不一致,濁腫,胞漿內(nèi)可見(jiàn)中毒顆粒,胞核固縮,部分核

8、膜消失甚至溶解,可見(jiàn)壞死現(xiàn)象,肝竇擴(kuò)張,充血。④模型組Ⅱ:低倍鏡所見(jiàn)肝組織結(jié)構(gòu)清晰,肝細(xì)胞形態(tài)欠規(guī)則,大小較一致,輕度濁腫,肝竇稍擴(kuò)張,稍充血。高倍鏡下所示肝細(xì)胞形態(tài)基本正常,胞漿稍渾濁,濁腫,核仁清楚,肝竇稍擴(kuò)張,稍充血,小葉間靜脈無(wú)擴(kuò)張,膽管無(wú)增生。
　　 結(jié)論:1.亞稀褶黑菇對(duì)SD大鼠肝臟有急性損害作用。
　　 2.靈芝煎劑對(duì)急性亞稀褶黑菇中毒大鼠肝功能有保護(hù)作用。
　　 3.靈芝煎劑對(duì)急性亞稀褶黑菇中毒大