持續(xù)低溫灌注對(duì)大鼠移植肝臟保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景: 自1963年Starzl成功實(shí)施第一例肝臟移植手術(shù)以來(lái)，肝移植已經(jīng)成為治療終末期肝病的有效手段。目前國(guó)內(nèi)移植供肝仍主要為尸體供肝，但隨著供肝來(lái)源的日益緊缺，對(duì)供肝的保存要求也日益增高。目前供肝保存的方式主要為靜止冷保存，也就是我們現(xiàn)在廣泛應(yīng)用的常規(guī)冷保存方法。晚近文獻(xiàn)報(bào)道，對(duì)保存期供肝進(jìn)行持續(xù)低溫灌注的效果要優(yōu)于單純的靜止冷保存。該灌注方法現(xiàn)僅為體外實(shí)驗(yàn)，目前尚未有研究報(bào)道此方法對(duì)移植術(shù)后肝臟功能及組織病理學(xué)的影響。

2、本實(shí)驗(yàn)研究對(duì)保存期供肝進(jìn)行持續(xù)性低溫灌注，通過(guò)觀(guān)察移植術(shù)后大鼠的肝臟功能及肝臟組織學(xué)變化來(lái)研究此保存方法對(duì)大鼠肝移植術(shù)后供肝的保護(hù)作用。 研究目的: 探討對(duì)保存期供肝進(jìn)行持續(xù)低溫灌注對(duì)大鼠移植后肝臟的保護(hù)作用及其機(jī)制。 研究方法: 參照Kamada的二袖套法建立大鼠肝移植模型，并根據(jù)王文濤等介紹的方法建立大鼠肝移植后膽總管內(nèi)置引流管引流膽汁模型。動(dòng)物分組，60只雄性健康Wistar大鼠，隨機(jī)分為3組：

3、 1.S組(假手術(shù)組)12只：入腹后僅分離肝十二指腸韌帶，但不阻斷肝門(mén)血供； 2.C組(離體供肝持續(xù)性冷灌注組)供受體各12只：在供肝切取前以UW液灌注，切取后仍以UW液行持續(xù)性門(mén)靜脈灌注5h，然后行大鼠原位肝移植。 3.R組(常規(guī)冷保存組)供受體各12只：在供肝切除前以Uw液灌注，切取后僅在0～4℃下恒溫靜止保存5h，然后行大鼠原位肝移植。 各組在原位肝移植成功結(jié)束無(wú)肝期后24小時(shí)，經(jīng)腹主動(dòng)脈采集血樣檢測(cè)血

4、清AST、ALT水平；記錄各組24小時(shí)膽汁流量；測(cè)定膽汁中葡萄糖含量以及GGT水平；光鏡下觀(guān)察肝臟組織學(xué)及超微結(jié)構(gòu)改變；采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡。對(duì)同一模型中各組的結(jié)果進(jìn)行對(duì)比性分析。 研究結(jié)果1.在大鼠原位肝移植模型中，C組和R組的ALT和AST水平明顯高于S組(P<0.05)，并且C組的轉(zhuǎn)氨酶水平低于R組(P<0.05)。 2.在大鼠原位肝移植模型中，C組平均每小時(shí)膽汁流量明顯高于R組(P<0.05).

5、3.在大鼠原位肝移植模型中，C組和R組的膽汁葡萄糖和GGT水平都高于S組(P<0.05)，并且C組的膽汁葡萄糖和GGT水平低于R組(P<0.05)。 4.在大鼠原位肝移植模型中，C組和R組的肝臟細(xì)胞凋亡率均高于S組(P<0.05)，但C組凋亡率明顯低于R組((P<0.05)。 5.在大鼠原位肝移植模型中，C組和R組肝臟組織學(xué)改變及中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)浸潤(rùn)程度都重于S組，但C組要輕于R組。 結(jié)論: 1.保存期供肝