花生細(xì)胞懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)白藜蘆醇及動力學(xué)研究.pdf

1、白藜蘆醇(Resveratrol)是一種具有抗癌、抗菌、雌激素作用、抗腫瘤、保護(hù)神經(jīng)系統(tǒng)等多種藥理活性作用的多酚類化合物。它廣泛存在于葡萄、花生、虎杖、桑椹等多種植物中,花生是含量最豐富的的植物之一。本文以花生植株為材料,進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)、搖瓶懸浮培養(yǎng),并建立了花生細(xì)胞搖瓶懸浮培養(yǎng)的動力學(xué)模型,探討了誘導(dǎo)子對花生細(xì)胞生長和白藜蘆醇積累的影響,內(nèi)容如下:
　　 在愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)中,培養(yǎng)基種類、外植體類型和激素配比對愈傷組織誘

2、導(dǎo)及白藜蘆醇含量有顯著影響。通過三元二次通用旋轉(zhuǎn)試驗確定愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)的最佳激素配比,從而得到最適培養(yǎng)基是:MS+2.5 mg/L2,4-D+1.8 mg/LKT+3.0 mg/L6-BA。高產(chǎn)白藜蘆醇花生細(xì)胞系生物量最大達(dá)到43.95g/L,白藜蘆醇產(chǎn)量最大達(dá)到9.073 mg/g。
　　 懸浮培養(yǎng)過程中研究了搖床轉(zhuǎn)速、接種量、pH和蔗糖濃度對懸浮細(xì)胞增殖率的影響。通過四元二次通用旋轉(zhuǎn)試驗確定懸浮培養(yǎng)的優(yōu)化條件為:搖床轉(zhuǎn)速1

3、30 r/min,接種量38g/L,pH5.8,蔗糖濃度40g/L。測定了培養(yǎng)過程中細(xì)胞組織的蛋白質(zhì)含量、苯丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶活性、過氧化物酶活性,它們的變化都在一定程度上反映了懸浮細(xì)胞生長及白藜蘆醇含量變化情況。
　　 在搖瓶懸浮培養(yǎng)中,建立了花生根細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的動力學(xué)模型,主要對花生根細(xì)胞生長、基質(zhì)消耗和白藜蘆醇合成的動力學(xué)進(jìn)行了描述。其方程分別為:
　　 研究了水楊酸(SA)和乙烯利對花生根細(xì)胞生物量及白藜蘆醇產(chǎn)量的影響