花生白藜蘆醇合酶基因轉(zhuǎn)化煙草與番茄的初步研究.pdf

1、本文闡述了白藜蘆醇合酶基因的研究進(jìn)展，對(duì)不同植物來(lái)源白藜蘆醇合酶基因的克隆和結(jié)構(gòu)進(jìn)行比較，分析該基因的誘導(dǎo)和表達(dá)特性，并對(duì)該基因轉(zhuǎn)基因植物的性狀進(jìn)行討論。為了對(duì)白藜蘆醇合酶功能進(jìn)一步研究，本研究擬將白藜蘆醇合酶基因?qū)霟煵莺头选?本研究以從花生中克隆的白藜蘆醇合酶基因?yàn)槟康幕?，利用植物表達(dá)載體pCAMBIA1302，構(gòu)建了含目的基因的植物重組表達(dá)載體pB6RS，并利用電穿孔法將pB6RS質(zhì)粒直接導(dǎo)入根癌農(nóng)桿菌LBA4404中

2、。 通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)將pB6RS轉(zhuǎn)化煙草(云煙85)，得到60株抗性再生植株，通過(guò)PCR檢測(cè)，有32株呈陽(yáng)性，目的基因PCR陽(yáng)性植株的轉(zhuǎn)化頻率約16％。 以番茄(合作903)子葉為受體材料，確定最佳不定芽分化培養(yǎng)基為MS+1 mg/L6-BA，不定芽分化率為100％，平均不定芽數(shù)為5.6。農(nóng)桿菌遺傳轉(zhuǎn)化番茄子葉優(yōu)化條件為外植體無(wú)需預(yù)培養(yǎng)，農(nóng)桿菌菌液OD<,600>為0.1左右，浸泡時(shí)間為5-10 min，共培養(yǎng)時(shí)間為2天。