版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、目的:以雙因素處理大鼠(去卵巢同時(shí)注射D-半乳糖)模擬早期老年性癡呆模型,觀察中藥復(fù)方脈絡(luò)寧和謝海洲方,西藥維生素(C+E)和阿托伐他汀藥物干預(yù)對(duì)大鼠腦組織Sirtl基因表達(dá)的影響。
方法:
1:動(dòng)物分組及取材:
選用4月齡雌性SD大鼠48只,隨機(jī)分為2組:假手術(shù)組(Sham組)、去卵巢組(OVX組),其中Sham組8只、OVX組40只。Sham組為雙側(cè)去除少量卵巢上脂肪組織,OVX組為去除雙側(cè)
2、卵巢。手術(shù)后2周Sham組給予生理鹽水0.5ml/d,腹腔注射;OVX組給予D-半乳糖20mg·0.5ml/d,腹腔注射。注射6周后將OVX組再次隨機(jī)分為5組:脈絡(luò)寧組(ODM),謝海洲方組(ODZ),V.C+V.E組(ODV),阿托伐他汀組(ODA)及病理對(duì)照組(OD),每組8只。各組均灌胃4周,灌胃劑量如下:ODM組脈絡(luò)寧注射液1.8ml/Kg.d,ODZ組謝海洲方16.83 g/kg.d,ODV組V.C45mg/Kg.d,V.E2
3、7mg/Kg.d,ODA組7.2mg/Kg·d,Sham組及OD組分別灌服蒸餾水1.5ml/Kg.d。灌胃過(guò)程中OVX組及Sham組繼續(xù)分別給予D-半乳糖及生理鹽水注射。手術(shù)后常規(guī)喂養(yǎng)12周后處死。
2:行為學(xué)測(cè)試
注射D-半乳糖四周后,用Morris水迷宮對(duì)所有大鼠進(jìn)行訓(xùn)練,每天4次,每次間隔5分鐘,共四天,做為學(xué)習(xí)記憶訓(xùn)練。注射D-半乳糖六周后進(jìn)行Morris水迷宮測(cè)試,一天內(nèi)測(cè)試4次,每次間隔5分鐘,共
4、測(cè)試一天。以后三次逃避潛伏期(escape latency)的平均值作為評(píng)價(jià)大鼠記憶能力的指標(biāo)。動(dòng)物處死前一天,同樣條件水迷宮1天,方法同上,記錄大鼠逃避潛伏期的平均值,作為評(píng)價(jià)大鼠空間記憶能力的指標(biāo)。
3:組織標(biāo)本的獲取及指標(biāo)測(cè)定
3.1:組織標(biāo)本的獲取麻醉大鼠,開(kāi)顱并迅速分離顳葉右側(cè)皮層置于液氮中,于-80℃低溫冰箱保存,用于組織總RNA及總蛋白的提取。
3.2: Sirtl基因mRNA表達(dá)
5、的測(cè)定用Trizol法提取總RNA。以GAPDH做內(nèi)參,RT-PCR法測(cè)定顳葉右側(cè)腦組織Sirtl基因在mRNA水平的相對(duì)表達(dá)量。
3.3: Sirtl蛋白表達(dá)的測(cè)定提取顳葉右側(cè)皮層腦組織總蛋白并用Lowry法測(cè)定蛋白含量,以每毫升樣品中的毫克蛋白量(mg/ml)表示。以GAPDH為內(nèi)參照,用western-blotting法分別檢測(cè)各組Sirtl的相對(duì)表達(dá)量。
4:數(shù)據(jù)處理
所有數(shù)據(jù)均采用均數(shù)
6、間的比較,應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理,所有數(shù)據(jù)均用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x-)±s)表示,多組間均值的比較用單因素方差分析。經(jīng)檢驗(yàn)各組方差齊,進(jìn)一步組間比較選用SNK多重比較檢驗(yàn),α=0.05。經(jīng)檢驗(yàn)方差不齊,進(jìn)一步組間比較選用Dunnett T3多重比較檢驗(yàn),α=0.05。
結(jié)果:
1:學(xué)習(xí)記憶能力的變化
Sham組逃避潛伏期為8.7±4.1,OVX+D-gal組逃避潛伏期為15.2±8.1。
7、與Sham組相比,OVX+D-gal組逃避潛伏期明顯延長(zhǎng)(P<0.05);給藥后,ODM+ODZ+ODV+ODA組逃避潛伏期為9.1±6.5,OD組逃避潛伏期為16.7±12.3。可見(jiàn),與OD組相比,ODM+ODZ+ODV+ODA組逃避潛伏期明顯縮短,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2:腦組織Sirtl mRNA水平的變化
OD組的Sirtl mRNA的相對(duì)表達(dá)量為0.464±0.063,Sham組的S
8、irtlmRNA的相對(duì)表達(dá)量為0.624±0.030,與Sham組相比,OD組的SirtlmRNA的相對(duì)表達(dá)量明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);ODM組的Sirtl mRNA的相對(duì)表達(dá)量為0.968±0.127、0DZ組的Sirtl mRNA的相對(duì)表達(dá)量為0.859±0.119,ODV組的Sirtl mRNA的相對(duì)表達(dá)量為0.790±0.076,ODA組的Sirtl mRNA相對(duì)表達(dá)量為0.603±0.091。與OD組相比,
9、ODM組、ODZ組,ODV組和ODA組的Sirtl mRNA相對(duì)表達(dá)量均有不同程度的升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3:腦組織Sirtl蛋白相對(duì)含量的變化
OD組的Sirtl相對(duì)表達(dá)量為0.581±0.199,Sham組Sirtl相對(duì)表達(dá)量為0.906±0.085,與Sham組相比,OD組Sirtl相對(duì)表達(dá)量明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)ODM組的Sirtl的相對(duì)表達(dá)量為2.023±
10、0.288、ODZ組的Sirtl的相對(duì)表達(dá)量為1.818±0.287,ODV組的Sirtl的相對(duì)表達(dá)量為1.605±0.225,ODA組的Sirtl相對(duì)表達(dá)量為1.033±0.091。與OD組相比,ODM組、ODZ組、ODV組、ODA組的Sirtl相對(duì)表達(dá)量均有不同程度的增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:
1:本模型大鼠顳葉右側(cè)皮層目標(biāo)蛋白Sirtl mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平均降低。
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 益智靈膠囊對(duì)老年性癡呆大鼠腦組織NO、SOD影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 智生膠囊Ⅰ號(hào)方對(duì)老年性癡呆模型大鼠腦組織SOD、蛋白影響的研究.pdf
- 腦靈湯對(duì)高膽固醇致Aβ增高老年性癡呆大鼠模型的影響.pdf
- 益智靈膠囊對(duì)老年性癡呆大鼠腦組織AchE、MAO酶影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 老年性癡呆小鼠腦組織中FKBPs及相關(guān)基因蛋白表達(dá)水平的研究.pdf
- 電針對(duì)老年性癡呆模型大鼠海馬線粒體酶活性的影響研究.pdf
- 菖蒲、遠(yuǎn)志提取液對(duì)老年性癡呆模型小鼠腦組織NO活性、蛋白質(zhì)含量的影響.pdf
- 益腦靈對(duì)老年性癡呆模型大鼠行為學(xué)、酶學(xué)及細(xì)胞凋亡影響的研究.pdf
- 硒、鋅對(duì)老年性癡呆模型的保護(hù)作用研究.pdf
- 電針對(duì)老年性癡呆模型大鼠海馬組織膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶活性的影響.pdf
- 梓醇對(duì)擬老年性癡呆大鼠的保護(hù)作用研究.pdf
- 電針對(duì)老年性癡呆大鼠記憶功能影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 老年性癡呆康復(fù)課件
- 電針對(duì)老年性癡呆模型大鼠海馬膽堿能神經(jīng)影響的研究.pdf
- 阿托伐他汀對(duì)老年性癡呆早期模型大鼠額葉皮層炎癥因子表達(dá)的影響.pdf
- 異甘草素對(duì)老年性癡呆模型的保護(hù)作用研究.pdf
- 解毒補(bǔ)腎法對(duì)老年性癡呆模型大鼠抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 老年性癡呆臨床治療探討.pdf
- 老年性癡呆動(dòng)物模型的研究進(jìn)展
- 針灸預(yù)處理對(duì)老年性癡呆模型大鼠Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論