熒光納米顆粒在腫瘤早期檢測中的應(yīng)用.pdf

1、近年來隨著納米技術(shù)的蓬勃發(fā)展，一些新興學(xué)科如納米化學(xué)、納米生物學(xué)、納米材料學(xué)、納米藥物學(xué)等也得到了飛速的發(fā)展。納米材料因其材料尺寸進(jìn)入納米量級(jí)(0.1nm-100nm)而具有諸如小尺寸效應(yīng)、表面效應(yīng)和宏觀量子隧道效應(yīng)等獨(dú)特效應(yīng)，表現(xiàn)出了一系列獨(dú)特的力學(xué)、電學(xué)、光學(xué)、磁學(xué)以及催化性能，從而在諸多領(lǐng)域中得到了廣泛的應(yīng)用。在納米材料的一個(gè)重要分支一納米顆粒中，功能化納米顆粒的應(yīng)用已經(jīng)成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。功能化生物納米顆粒的出現(xiàn)使傳統(tǒng)生物傳感器

2、的檢測尺度大為縮小。研究表明，功能化生物納米顆粒是一種非常理想的原位、活體、實(shí)時(shí)獲取生命信息的工具。因此，開展功能化生物納米顆粒的研制與應(yīng)用研究意義重大。本論文以有機(jī)熒光染料異硫氰酸羅丹明(TRITC)為核，二氧化硅為殼的熒光納米顆粒的制備為基礎(chǔ)，開展了以下一系列的工作： 1.以環(huán)已烷，正已醇，曲拉通、TRITC及四乙氧基硅烷(TEOS)等為主要原料，采用微乳液法成核硅烷化試劑包殼的方法制各了核殼熒光(TRITC)納米顆粒。通過

3、透射電子顯微鏡(TEM)、熒光分光光度計(jì)等儀器對(duì)其進(jìn)行了表征，考察了包括內(nèi)核染料濃度、納米顆粒的熒光染料泄露等多種因素對(duì)熒光納米顆粒成功制備的影響。研究結(jié)果表明：制備的核殼熒光納米顆粒沒有改變內(nèi)核染料自身的熒光特性；內(nèi)核染料濃度為0.06 mmol/L時(shí)所制備出的納米顆粒熒光強(qiáng)度最大；納米顆粒包埋的熒光染料不易泄露且熒光穩(wěn)定性較好。 2.通過四乙氧基硅烷(TEOS)和N-(B-氨乙基)-?-氨丙基三乙氧基硅烷(AEAPS)共同水

4、解得到的熒光(TRITC)納米顆粒表面帶有氨基基團(tuán)，利用雙交聯(lián)劑戊二醛將熒光納米顆粒與單克隆anti-HER2抗體進(jìn)行偶聯(lián)，該抗體可與對(duì)HER2高表達(dá)的人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞發(fā)生抗體.抗原特異性反應(yīng)，因此制備了功能化的熒光納米顆粒，利用納米顆粒的熒光特性進(jìn)而實(shí)現(xiàn)了對(duì)卵巢癌SKOV-3細(xì)胞的識(shí)別和早期檢測。結(jié)果表明：該熒光納米顆粒表面易于修飾抗體等生物分子且在一定濃度范圍內(nèi)與SKOV-3細(xì)胞具有良好的生物相容性；使用此熒光納米顆粒進(jìn)行癌

5、細(xì)胞標(biāo)記較之傳統(tǒng)的熒光染料分子標(biāo)記方法在靈敏度、選擇性和熒光穩(wěn)定性等方面均有了較大的改善，有望成為生物檢測分析中的一種新型檢測技術(shù)。 3.利用銅(Ⅱ)溶液對(duì)熒光納米顆粒有明顯的熒光猝滅現(xiàn)象，構(gòu)建了一種檢測微量銅的新方法。該方法具有較好的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性，為銅的分析提供一種可供選擇的測定方法。本文對(duì)銅(Ⅱ)的檢測實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行了優(yōu)化選擇：采用pH6.0的磷酸鹽緩沖溶液(PBS)做底液，取新制的熒光納米顆粒懸浮液1mL(3g/L)，加入