熒光納米顆粒傳感技術(shù)在早期腫瘤檢測(cè)中的應(yīng)用.pdf

1、近年來隨著納米技術(shù)的蓬勃發(fā)展，一些新興學(xué)科如納米化學(xué)、納米生物學(xué)、納米材料學(xué)、納米藥物學(xué)等也得到了飛速的發(fā)展。納米材料因其具有諸如小尺寸效應(yīng)（0.1nm～100nm）、表面效應(yīng)和宏觀量子隧道效應(yīng)等獨(dú)特效應(yīng)，表現(xiàn)出了一系列獨(dú)特的力學(xué)、電學(xué)、光學(xué)、磁學(xué)以及催化性能，從而在諸多領(lǐng)域中得到了廣泛的應(yīng)用。在納米材料的一個(gè)重要分支——納米顆粒中，功能化納米顆粒的應(yīng)用已經(jīng)成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。功能化生物納米顆粒的出現(xiàn)使傳統(tǒng)生物傳感器的靈敏度、選擇性得到

2、了極大的提高。研究表明，功能化生物納米顆粒是一種非常理想的原位、活體、實(shí)時(shí)獲取生命信息的工具。因此，開展功能化生物納米顆粒的研制與應(yīng)用研究意義重大。本論文以有機(jī)熒光染料異硫氰酸羅丹明（TRITC）與納米顆粒相互作用為基礎(chǔ)，開展了以下一系列的工作： 1.經(jīng)典夾心結(jié)構(gòu)功能性熒光納米顆粒的制備與研究。 采用溶膠—凝膠法合成納米二氧化鈦，以還原氯金酸法得到小尺寸金納米顆粒，嗣后與有機(jī)熒光染料TRITC反應(yīng)，制備得到經(jīng)典夾心結(jié)構(gòu)的

3、二氧化鈦熒光納米顆粒。通過TEM、AFM、XPS以及熒光光譜儀等手段對(duì)其形貌及熒光光譜等性質(zhì)進(jìn)行了表征。研究結(jié)果表明：經(jīng)典夾心結(jié)構(gòu)使基于納米二氧化鈦的熒光納米顆粒具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性和光學(xué)穩(wěn)定性。 2.功能性熒光納米顆粒性質(zhì)研究及其在腫瘤早期檢測(cè)中的應(yīng)用。 通過利用熒光（TRITC）納米顆粒的夾心網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)與anti—HER2抗體相互作用，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)顆粒與抗體的交聯(lián)，成功制備了功能化的熒光納米顆粒。anti—HER2可與對(duì)

4、HER2高表達(dá)的人卵巢癌SKOV—3細(xì)胞發(fā)生抗體—抗原特異性反應(yīng)，利用該納米顆粒的熒光特性實(shí)現(xiàn)了對(duì)卵巢癌SKOV—3細(xì)胞的識(shí)別和早期檢測(cè)。研究結(jié)果表明：該熒光納米顆粒表面易于修飾抗體等生物分子且與SKOV—3細(xì)胞具有良好的生物相容性，使用此熒光納米顆粒進(jìn)行癌細(xì)胞標(biāo)記較之傳統(tǒng)的熒光染料分子標(biāo)記方法在靈敏度、選擇性和熒光穩(wěn)定性等方面均有了較大的改善，有望成為生物檢測(cè)分析中的一種新型檢測(cè)技術(shù)。 3.基于TRITC熒光染料的熒光強(qiáng)度變化

5、，實(shí)現(xiàn)納米顆粒的量化過程。 利用納米金顆粒對(duì)熒光素（TRITC）有明顯的熒光猝滅現(xiàn)象的特性，構(gòu)建了一種檢測(cè)納米金顆粒的新方法。該方法具有較好的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性，為納米金的量化提供一種可供選擇的測(cè)定方法。并對(duì)納米金的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行了優(yōu)化選擇：在新制的含有TRITCpH6.5的磷酸鹽緩沖溶液（PBS）中，加入適量的納米金溶液，使其在40℃水浴中反應(yīng)40min后進(jìn)行熒光強(qiáng)度測(cè)量。在此最佳實(shí)驗(yàn)條件下，該方法測(cè)定金的檢測(cè)限為2.19ppm