改良HTK液灌注對無心跳供體豬心的保護作用.pdf

1、第一部分、無心跳供體豬心熱缺血時限的探討
　　 目的：探討可用于移植的無預處理的無心跳供體豬心熱缺血時限。
　　 方法：實驗家豬21對(每對含供、受體各一只)，共分成四組。S0組(對照組n=6例)：供體心臟以Stanford液1000ml主動脈根部灌注，心臟停跳后立即切取供心，置于4℃Stanford液中保存2 h；S15組(熱缺血15 min組n=6例)：心臟放血停跳，熱缺血15 min后，用4℃Stanford液10

2、00 ml灌注，切取供心，置于4℃Stanford液中保存2 h；S30組(熱缺血30 min組n=6例)：心臟放血停跳，熱缺血30 min；S45組(熱缺血45 min組n=3例)：心臟放血停跳，熱缺血45 min；S30組、S45組灌注及保存方法同S15組。各組均以雙腔心臟移植方法行原位移植，監(jiān)測供體心臟移植前后的血流動力學指標。測定心肌酶、肌鈣蛋白I、ATP、心肌含水量等指標，以及電鏡觀察心肌組織超微結構改變。
　　 統(tǒng)計

3、學方法：比較兩組之間的差異采用student t檢驗，多組間的差異比較采用方差分析。
　　 結果：心臟移植實驗中S0、S15、S30組均成功復跳，脫離體外循環(huán)輔助，S45組均無法復跳。與S0、S15組比較，S30組復跳時間、并行循環(huán)時間延長(P<0.05)。S30組心輸出量、ATP含量明顯下降(P<0.05)，心肌含水量、心肌酶、肌鈣蛋白I明顯升高(P<0.05)。電鏡觀察超微結構S0、S15、S30組心肌有損傷，以S30組損傷

4、較重，但結構尚完整。S45組電鏡觀察超微結構嚴重破壞，為不可逆改變。
　　 結論：
　　 1、常溫失血30分鐘內無預處理的無心跳供體豬心可用于心臟移植研究；
　　 2、常溫失血45分鐘后，無預處理的無心跳供體豬心的心肌超微結構已經造成了不可逆轉的嚴重破壞，不可用于心臟移植。
　　 第二部分、改良HTK液灌注對無心跳供體豬心的保護作用
　　 目的：探討改良HTK液灌注在熱缺血30分鐘無心跳供體豬心移

5、植中的保護作用。
　　 方法：實驗家豬24對(每對含供、受體各一只)，共分成四組。S0組(對照組n=6例)：心臟以Stanford液1000ml主動脈根部灌注，心臟停跳后立即切取供心，置于4℃Stanford液中保存2 h；S30(常規(guī)灌注組n=6例)：心臟放血停跳熱缺血30 min后，用4℃ Stanford液1000 ml灌注，切取供心置于4℃Stanford液中保存2 h；SH30(HTK灌注組n=6例)：心臟放血停跳熱缺

6、血30 min后，灌注HTK液1000ml，切取供心.置于4℃HTK液中保存2 h，心臟復跳前灌注500ml去白細胞血；SHO30(改良HTK灌注組n=6例)：心臟放血停跳后熱缺血30 min，灌注改良HTK液1000ml(含血栓素酶抑制劑10mg肝素5mg)，切取供心，置于4℃改良HTK液中保存2 h，心臟復跳前灌注500ml去白細胞血(含血栓素合成酶抑制劑5mg+肝素3mg)。各組均以雙腔靜脈原位心臟移植方法行原位移植，監(jiān)測供體心臟

7、移植前后的血流動力學指標，測定心肌酶、肌鈣蛋白I、ATP、TXB2、SOD、MDA、心肌細胞凋亡、Bcl-2，Bax，Caspase-3基因蛋白水平的表達情況等指標，電鏡觀察心肌組織超微結構改變。
　　 統(tǒng)計學方法：比較兩組之間的差異采用student t檢驗，多組間的差異比較采用方差分析。
　　 結果：SH30、SHO30組各項檢測指標均優(yōu)于S30組(P<0.05)。SH30、SHO30組間血流動力學與S0組無差別(P

8、>0.05)，但其余生化指標較S0組差(P<0.05)。SH30、SHO30組間血流動力學無明顯差異(P>0.05)，SHO30在心肌酶學、cTn I、TXB2、ATP、SOD、MDA指標優(yōu)于SH30組(P<0.05)，而心肌細胞凋亡、Bax、Caspase-3基因蛋白水平的表達高于SH30組，Bcl-2基因蛋白的表達低于SH30組。心肌超微機構提示S0、SHO30組未發(fā)現(xiàn)血栓，而在S30組有大量血栓，SH30組也在冷保存后發(fā)現(xiàn)微循環(huán)血

9、栓。從心肌結構、線粒體及微血管內皮細胞變化來看，S0組最完整，SHO30次之，S30組最差。
　　 結論：
　　 1、改良HTK液灌注可以減輕熱缺血30分鐘豬NHBD心臟缺血再灌注損傷。
　　 2、血栓素合成酶抑制劑與肝素聯(lián)合應用可以改善熱缺血30分鐘豬NHBD供心心肌微循環(huán)，增強對豬NHBD供心的保護作用。
　　 3、血栓素合成酶抑制劑可以減輕心肌缺血再灌注損傷過程中細胞凋亡。