馬精液保存的研究.pdf

1、為了提高精液保存后品質，分別對馬精液保存稀釋液、凍前預處理、冷凍保護劑和解凍進行了研究。 實驗一：進行馬精液常溫、低溫和超低溫稀釋液及冷凍劑型的篩選，并比較了不同個體馬精液品質差異。結果表明：(1)常溫保存時， 2.5﹪甘油液和7﹪葡萄糖液精子活率顯著高于5﹪甘油液和0.9﹪Nacl液(P<0.05)，存活時間極顯著高于5﹪甘油液和0.9﹪Nacl液(P<0.01)；(2)低溫保存時，10﹪奶粉液和5﹪卵黃液精子活率顯著高于0.

2、8﹪卵黃液(P<0.05)，極顯著高于7﹪葡萄糖液(P<0.01)，存活時間較0.8﹪卵黃液和7﹪葡萄糖液差異極顯著(P<0.01)；(3)冷凍保存時，11﹪乳糖液、10﹪蔗糖液和4﹪果糖液顆粒凍精活率均極顯著高于0.1﹪EDTA液、3﹪葡萄糖液和1.25﹪Tris液(P<0.01)；細管凍精活率顯著高于3﹪葡萄糖液和1.25﹪Tris液(P<0.05)，極顯著高于0.1﹪EDTA液(P<0.01)，且同一種稀釋液的顆粒凍精和細管凍精的

3、凍后活率和復蘇率差異顯著(P<0.05)。10﹪蔗糖液和4﹪果糖液凍后精子頂體完整率極顯著高于11﹪乳糖液(P<0.01)，畸形率顯著高于11﹪乳糖液(P<0.05)，顆粒和細管凍精差異不顯著(P>0.05)；(4)馬原精活力和凍后精子活率存在個體差異(P<0.05)。 實驗二：初步探討了凍前預處理對馬精液保存效果的影響。結果表明：(1)相同離心速度離心7min，10min凍后精子活率及復蘇率顯著高于離心15min的(<0.05

4、)：但2000r/min和3000r/min離心后精子活力較1000r/min和1500r/min顯著下降；1000r/min和1500r/min分別離心7min，10min凍后精子活力和復蘇率差異不顯著(P>0.05)；(2)精液與精清比在1/1和1/2時，其凍后活率及復蘇率顯著高于0/1和1/4時(P<0.05)；(3)精液與稀釋液之比為1∶2和1∶3時其凍后精子活力和復蘇率顯著高于1∶1(P<0.05)；(4)精液平衡2h、3h和

5、4h凍后精子活力和復蘇率差異均不顯著(P>0.05)；(5)采用銅網和氟板為冷凍材質時凍后精子活力和復蘇率極顯著高于采用鋼板(P<0.01)：(6)液氮熏蒸法凍后精子活力和復蘇率極顯著高于直接投入液氮法(P<0.01．)；(7)在始凍溫度為-80℃、110℃和-140℃下分別熏蒸5min、7min、10min和15min，其凍后精子活力和復蘇率差異均不顯著(P>0.05)。 實驗三：初步研究了不同冷凍保護劑和解凍方法對馬精液保存

6、效果的影響。結果表明： (1)當用國產甘油、進口甘油、甘油+DMSO作為冷凍保護劑時其凍后精子活力和復蘇率顯著(P<0.05)高于用乙二醇和DMSO作為保護劑。(2)3.8﹪、5﹪、6﹪甘油濃度解凍后精子活力和復蘇率顯著(P<0.05)高于7﹪甘油濃度，極顯著(P<0.01)高于9﹪甘油濃度：(3)0.1﹪EDTA解凍液凍后精子活力和復蘇率顯著(P<0.05)高于其它6﹪蔗糖、2.9﹪檸檬酸鈉、5﹪葡萄糖解凍液，畸形率和項體完整

7、率顯著(P<0.05)f氐于6﹪蔗糖和2.9﹪檸檬酸鈉，與5﹪葡萄糖解凍液差異不顯著(P>0.05)。(4)干解凍和濕解凍對凍后精子活力、復蘇率、畸形率和頂體完整率等沒有顯著影響(P>0.05)。(5)58℃和78℃解凍后其精子活力和復蘇率顯著(P<0.05)高于38℃下解凍，極顯著(P<0.01)高于4℃下解凍，但凍后精子畸形率和頂體完整率差異均不顯著(P>0.05)。 研究表明，馬精液常溫保存時，7﹪葡萄糖液保存效果最好；低