真鯛（Pagrosomus major）精液超低溫保存及其低溫?fù)p傷研究.pdf

1、⑧研究生學(xué)位論文真鯛( P a g r o s o m u sm a j o r ) 精液超低溫保存及其低溫?fù)p傷研究劉清華㈣h # 張士堆越授李軍研究員?。w 堡芏塑±?t 菱鱟蘭塑芏* 女* * 日_ —! ! ! ! ±：! ! i ! —! 十＆i ㈣—! ! ! ! ±二! —a中國海洋走學(xué)真B 自( P a g r o s o m u sM 如一精液超低溫保存及其低溫?fù)p傷研究而且與新鮮精液相比，超

2、低溫保存后的精液對胚胎發(fā)育的影響不大。采用此方法超低溫保存的真鯛精液在受精率和孵化率上均獲得了接近于新鮮精液的水平，因此．此方法可大規(guī)模應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)以及魚類種質(zhì)資源的長期保存和生物多樣性的保護(hù)。本文對保存1 周后的精液從生理活性及形態(tài)結(jié)構(gòu)方面分析了超低溫保存對精子的損傷。通過電腦輔助分析系統(tǒng)分析超低溫保存后精子的運(yùn)動活力。發(fā)現(xiàn)超低溫保存過程對精子的運(yùn)動方式及快速運(yùn)動的精子的運(yùn)動速度基本無影響，但激活后其活力維持的時間與鮮精比較顯著的

3、縮短。鮮精激活后1 5 0S 精子平均運(yùn)動率從8 6 ．7 ±4 ．9 ％降至6 0 ．7 ±8 ．6 ％，而C o r t l a n d 稀釋液稀釋的1 5 ％D M S O 超低溫保存的精液激活后其運(yùn)動率從8 0 ．4 ±5 ．8 ％降至l O ．7 ±9 ．4 ％。經(jīng)C o r t l a n d 稀釋液稀釋的1 5 ％D M S O 超低溫保存的精液，電鏡觀察發(fā)現(xiàn)約5 0 ％一7 0 ％

4、的精子保持正常的形態(tài)結(jié)構(gòu)，1 0 ％一2 0 ％的精子的質(zhì)膜、核膜或線粒體發(fā)生不同程度的膨脹和破裂，而有約1 0 ％～2 0 ％精子遭受了較嚴(yán)重的損傷，質(zhì)膜完全破裂，只發(fā)現(xiàn)細(xì)胞核、線粒體和尾部結(jié)構(gòu)。 羅丹明1 2 3 ( R h1 2 3 ) ，碘化丙錠( P I ) 熒光雙染色流式細(xì)胞觀察近一步確定了1 5 ％D M S O 對真鯛精液良好的保護(hù)效果，7 4 ．8 ％精子保持完整的膜結(jié)構(gòu)和線粒體的正常功能。除此之外，保存時間對真鯛精液