TLR7mRNA在EV71感染死亡病例肺和腦組織中的表達及意義.pdf

1、目的：手足口病（HFMD）近年來其發(fā)病率及死亡率較高，腸道病毒71型(EV71)感染易致嬰幼兒重癥手足口病例。但其具體發(fā)病機制尚未完全明確，目前已經(jīng)確定TLR7可以識別某些單鏈RNA病毒，但人體組織水平的EV71病毒與TLR7的關(guān)系目前還未見相關(guān)報道。因此，本課題擬通過原位雜交的方法檢測EV71感染死亡病例蠟塊腦和肺組織中TLR7mRNA的表達，試圖從基因的水平研究其在EV71感染中的意義。
　　方法：⑴收集我院兒科從2008年9

2、月至2015年2月所有手足口病死亡病歷進行臨床資料的回顧性分析。⑵以經(jīng)10％的中性福爾馬林固定、常規(guī)石蠟包埋的EV71感染后死亡病例腦組織及肺組織標(biāo)本9例為實驗組（EV71組），意外死亡病例7例為對照組，觀察實驗組HE染色病理切片肺、腦組織的特征。⑶以顯色原位雜交(CISH)的方法檢測TLR7mRNA在肺、腦組織蠟塊切片的表達，按陽性細胞數(shù)所占比例進行分級，并用圖像分析軟件(Image-pro Plus6.0)半定量檢測其陽性的積分光密

3、度(IOD)值，SPSS18.0統(tǒng)計軟件對計量資料進行統(tǒng)計學(xué)分析。所有病例均已簽知情同意書且課題通過了醫(yī)院倫理委員會的審核。
　　結(jié)果：①病歷回顧:我院自2008年9月至2015年2月共診斷手足口病5145例，住院874例，其中重癥病例464例，危重癥病例77例，最終死亡病例為26例。死亡病例中3歲以下嬰幼兒25例，患兒均伴有發(fā)熱、白細胞升高及高血糖，晚期均可出現(xiàn)肢抖、嗜睡及腦膜刺激征等，伴有昏迷、休克、腦疝及神經(jīng)源性肺水腫、肺出

4、血，3例沒有手足皰疹、口腔皰疹或潰瘍等典型表現(xiàn)。15例X線胸片可以看到彌漫狀或者斑片狀滲出影，呈典型肺水腫表現(xiàn)，9例胸片可見肺紋理增粗，2例未做影像學(xué)檢查即死亡。死亡病例病情均進展迅速，均于入院72小時內(nèi)死亡。②尸檢及病理改變:EV71組9例大體解剖均可見肺切面暗紅、有液體流出，腦回變寬，溝變淺。9例死亡病例鏡下均可見肺間質(zhì)見較多單核細胞與淋巴細胞浸潤，部分肺泡內(nèi)見少量紅染物及炎細胞浸潤;全部病例腦部切片可見腦細胞與間質(zhì)水腫，5例可見腦

5、干間質(zhì)灶片狀變性，所有病例均有腦干血管周見淋巴細胞浸潤，3例可見明顯“血管套”現(xiàn)象。③CISH結(jié)果:TLR7在肺組織單核-巨噬細胞、淋巴細胞、中性粒細胞及部分支氣管壁上皮細胞、肺泡上皮細胞可見陽性表達。腦組織中TLR7的陽性表達主要在神經(jīng)細胞、小膠質(zhì)細胞以及部分淋巴細胞的胞漿。TLR7mRNA在EV71組肺組織中呈陽性至強陽性表達，IOD253583.76，在對照組肺組織中陰性至弱陽性，IOD15627.29，P＜0.05。TLR7mR

6、NA在EV71組腦組織中呈陽性至強陽性表達，IOD193728.00，在對照組腦組織中陰性至弱陽性表達，IOD20354.78，P＜0.05。差異具有顯著性。
　　結(jié)論：⑴手足口病死亡病例均伴有發(fā)熱、白細胞升高及高血糖，晚期均可出現(xiàn)肢抖、嗜睡、顱內(nèi)高壓及腦膜刺激征等，伴有昏迷、休克、腦疝及神經(jīng)源性肺水腫、肺出血，部分可沒有手足皰疹、口腔皰疹或潰瘍等，以3歲以下嬰幼兒為主。⑵EV71感染手足口病的尸檢及病理證實其主要死因為腦膜腦炎，