熒光探針的合成及表征.pdf

1、以羅丹明B為原料設(shè)計(jì)合成了一系列的烷基羅丹明B酯衍生物.優(yōu)化得到了適宜的工藝條件.以SOCl<,2>為?；噭?羅丹明B與醇的摩爾比為1:10,反應(yīng)溫度70℃,反應(yīng)時(shí)間7h,羅丹明B酯衍生物的收率可達(dá)80﹪以上.熒光性能分析結(jié)果表明,烷基羅丹明B酯的烷基結(jié)構(gòu)對(duì)其熒光強(qiáng)度、最大吸收和發(fā)射波長(zhǎng)影響不大.甲基羅丹明B酯最大吸收和發(fā)射波長(zhǎng)不受濃度的影響,熒光強(qiáng)度隨濃度增加而增加；隨著溶劑極性的增加,其最大吸收、發(fā)射波長(zhǎng)紅移,而熒光強(qiáng)度降低；隨

2、著激發(fā)光照射時(shí)間的增長(zhǎng),其最大吸收和發(fā)射波長(zhǎng)無(wú)變化,但熒光強(qiáng)度明顯降低,且在極性溶劑中降幅大于其在非極性溶劑中. 合成了硝基羅丹明B、氨基羅丹明B及鹵代羅單明B.硝基羅丹明B與羅丹明B相比熒光強(qiáng)度減弱,最大吸收和發(fā)射波長(zhǎng)紅移.氨基羅丹明B與羅丹明B相比,熒光強(qiáng)度增強(qiáng),最大吸收和發(fā)射波長(zhǎng)紅移.隨著溶劑極性的增加,硝基羅丹明B和氨基羅丹明B的最大吸收和發(fā)射波長(zhǎng)略向紅移,而熒光強(qiáng)度降低. 單鹵代后羅丹明B與羅丹明B相比,熒光強(qiáng)

3、度增大,最大吸收和發(fā)射波長(zhǎng)紅移,其熒光強(qiáng)度的順序?yàn)镮

4、生,穩(wěn)定性能就越好.隨著熒光素酯中羧基碳鏈的增長(zhǎng),脂酶檢測(cè)的靈敏度有了進(jìn)一步提高.篩選得到了研究脂酶的理想熒光探針二(十二酸)熒光素酯,用其可以檢測(cè)0.1微克/毫升的脂酶的活性. 以氨基羅丹明B和氨基熒光素為原料,采用草酰氯單乙酯作為連接劑,合成了具有雙發(fā)色基團(tuán)的新化合物RH-F.該物質(zhì)在紫外可見(jiàn)吸收光譜上出現(xiàn)兩個(gè)吸收峰,分別接近于氨基熒光素及氨基羅丹明B.將甲基羅丹明B酯和RHB-F分別應(yīng)用于測(cè)定DNA濃度,優(yōu)化了分析條件,建