重度磨耗對(duì)大鼠外周及初級(jí)神經(jīng)中樞影響的初步研究.pdf

1、研究背景:
　　重度磨耗(severe occlusal attrition,SOA)作為口腔臨床上常見(jiàn)的慢性疾病,是導(dǎo)致顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病(temporomandibular joint disorder,TMD)的一個(gè)重要原因,常伴隨著疼痛、下頜運(yùn)動(dòng)異常、顳下頜關(guān)節(jié)(temporomandibular joint,TMJ)區(qū)彈響和雜音等癥狀,其中咀嚼肌和顳下頜關(guān)節(jié)區(qū)疼痛常為患者就診的首要原因。前期關(guān)于重度磨耗的基礎(chǔ)研究主要集中于

2、口腔局部組織的反應(yīng),研究證實(shí)重度磨耗會(huì)引起咀嚼肌和顳下頜關(guān)節(jié)發(fā)生適應(yīng)性改建,但是針對(duì)重度磨耗引起的口頜面部疼痛以及神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)反應(yīng)的研究較少。在其他口頜面部神經(jīng)病理性痛和炎性痛的模型中發(fā)現(xiàn),傷害性刺激可引起外周感覺(jué)神經(jīng)中樞三叉神經(jīng)節(jié)(trigeminal ganglion,TG)內(nèi)降鈣素基因相關(guān)肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)表達(dá)增多,腦干及延髓三叉神經(jīng)脊束核(spinal nucleus

3、of trigeminal nerve,SpⅤ)區(qū)域內(nèi)的細(xì)胞絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases,MAPK)通路激活,磷酸化 p38(phospho-p38,p-p38)蛋白的表達(dá)水平上調(diào)。因此,本研究擬以疼痛作為研究重點(diǎn),分析重度磨耗后口頜面部疼痛的閾值變化及神經(jīng)系統(tǒng)的相關(guān)反應(yīng)。
　　研究目的:
　　建立并評(píng)價(jià)重度磨耗的動(dòng)物模型,觀察重度磨耗后大鼠咬肌機(jī)械壓痛敏感程度的變化

4、,并利用相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)手段觀察三叉神經(jīng)節(jié)、腦干及延髓內(nèi)的相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)的變化,以分析重度磨耗后大鼠外周及初級(jí)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的反應(yīng)。
　　研究方法:
　　1.采用外科顯微鏡下逐漸均勻降低大鼠上頜后牙牙冠的方法建立重度磨耗動(dòng)物模型,觀察大鼠的表現(xiàn)型及體重變化,利用行為學(xué)方法檢測(cè)大鼠咬肌機(jī)械壓痛的敏感程度。
　　2.利用免疫熒光染色方法對(duì)重度磨耗后大鼠三叉神經(jīng)節(jié)內(nèi) CGRP表達(dá)水平的變化進(jìn)行分析。
　　3.利用免疫熒光染色和

5、蛋白免疫印跡方法對(duì)重度磨耗后大鼠腦干及延髓中p38MAPK表達(dá)水平的變化進(jìn)行分析。
　　研究結(jié)果:
　　1.采用外科顯微鏡下逐漸均勻降低大鼠上頜后牙牙冠的方法成功建立了重度磨耗的動(dòng)物模型,建模后大鼠表現(xiàn)型無(wú)明顯異常。3d時(shí)咬肌機(jī)械壓痛閾值顯著降低,持續(xù)到21d,第28d時(shí)基本恢復(fù)到基線水平。
　　2.重度磨耗可引起大鼠三叉神經(jīng)節(jié)上頜牙槽神經(jīng)神經(jīng)元相關(guān)區(qū)域內(nèi)的CGRP表達(dá)水平的升高。建模后的3d CGRP陽(yáng)性神經(jīng)元的數(shù)量

6、顯著增加,達(dá)到峰值,隨后3w CGRP陽(yáng)性神經(jīng)元的數(shù)量有所減少但仍明顯高于對(duì)照組,第28d時(shí)基本恢復(fù)到正常水平。
　　3.重度磨耗后大鼠腦干及延髓三叉神經(jīng)脊束核相關(guān)區(qū)域內(nèi) p38MAPK通路被激活,建模后3d p-p38蛋白表達(dá)顯著上調(diào),達(dá)到峰值后開(kāi)始逐漸減少,激活狀態(tài)持續(xù)3w,第28d時(shí)p-p38蛋白的表達(dá)基本恢復(fù)到正常水平。
　　結(jié)論:
　　1.本實(shí)驗(yàn)成功建立了重度磨耗的動(dòng)物模型,行為學(xué)方法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)大鼠重度磨耗后可