心理應激對小鼠中樞及外周免疫器官IL-6的影響及中藥的干預作用.pdf

1、實驗目的
　　 通過小站臺水環(huán)境應激建立心理應激動物模型,探討心理應激對機體中樞及外周免疫器官和組織IL-6表達的影響及中藥的干預作用,為情志致病的研究提供一定的可靠依據(jù)。
　　 實驗材料和方法
　　 82只昆明小鼠隨機分為7組:正常組、8h應激組、8h干預組、24h應激組、24h干預組、72h應激組、72h干預組。各應激組和干預組分別給予小站臺水環(huán)境應激,各應激組給予蒸餾水灌胃,各干預組同時給予中藥加味逍遙散干

2、預.于應激8h、24h、72h后摘眼球取血,離心后取血漿。處死后小鼠在冰面上取下丘腦、左腦、右腦、胸腺、腸系膜淋巴結(jié)、脾臟,分別稱重。再將各組織勻漿,測勻漿液中蛋白濃度,最后用EIJSA法檢測小鼠血漿、下丘腦、左腦、右腦、胸腺、腸系膜淋巴結(jié)中IL-6濃度。
　　 實驗結(jié)果
　　 小站臺水環(huán)境應激能顯著降低動物的體重、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)。同一種應激方式、不同應激時間對小鼠中樞及外周免疫器官IL-6表達的影響不同,具體結(jié)果如

3、下:①小站臺水環(huán)境應激8h可以升高小鼠血漿中IL-6的水平(p0.05),提示機體存在著一種自我調(diào)節(jié)機制,使血漿中IL-6的水平維持相對平衡。8h干預組小鼠血漿中IL-6水平較應激組低(p<0.05),其他時間點無差異,可見加味逍遙散能在一定程度上調(diào)節(jié)血漿中IL-6的水平。②隨應激時間的延長,小鼠腸系膜淋巴結(jié)

4、表達IL-6的水平呈上升趨勢,僅8h應激組、24h應激組小鼠腸系膜淋巴結(jié)IL-6水平明顯高于正常組(P<0.01),72h應激組與正常組無顯著差異(p>0.05)。加味逍遙散對8h應激、24h應激引起的腸系膜淋巴結(jié)IL-6表達升高均有下調(diào)的作用(P<0.05)。③該心理應激對小鼠胸腺表達IL-6的影響較腸系膜淋巴結(jié)強。隨應激時間的延長,小鼠胸腺表達IL-6水平逐漸升高,24h應激組、72h應激組胸腺中IL-6的表達明顯高于正常組(P<0

5、.01),提示心理應激對中樞免疫器官-胸腺的影響遲于周圍免疫器官。同時,加味逍遙散隨應激時間的延長,下調(diào)胸腺分泌IL-6的作用更明顯。④小站臺水環(huán)境應激對與情緒密切相關(guān)的下丘腦表達IL-6的影響亦因時間的不同而存在差異。8h應激組、24h應激組小鼠下丘腦IL-6的表達明顯高于正常組(P<0.01),72h應激組與正常組無顯著性差異(P>0.05),提示下丘腦能在一定范圍內(nèi)保持IL-6水平的動態(tài)平衡。加味逍遙散也能調(diào)節(jié)8h應激、24h應激

6、引起下丘腦內(nèi)IL-6水平的升高,提示加味逍遙散可以作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)。⑤小站臺水環(huán)境應激對小鼠左、右腦內(nèi)IL-6的分泌僅在24h應激時出現(xiàn)明顯的升高(P<0.01),8h應激、72h應激對其影響不顯著(P>0.05),提示小鼠左腦、右腦對心理應激的反應晚于下丘腦,同時也說明小鼠左、右腦內(nèi)存在著較強的平衡功能。加味逍遙散能明顯降低24h應激引起的左、右腦IL-6的升高(P<0.01),提示加味逍遙散可以直接作用于左、右腦調(diào)節(jié)IL-6的分泌

7、。
　　 實驗結(jié)論
　　 ①小站臺水環(huán)境應激先傷機體神氣,繼而引起形體變化和臟腑組織的病理改變。②小站臺水環(huán)境不同時間的應激可影響血漿IL-6的水平及胸腺、淋巴結(jié)等組織IL-6的表達,說明IL-6可能與心理應激引起的細胞和組織損傷及血管損害有關(guān)。③心理應激可影響中樞下丘腦、左腦、右腦中IL-6的表達,而且下丘腦對心理應激的反應比左、右腦更敏感。④小站臺水環(huán)境應激以肝氣郁結(jié)證為主,中藥加味逍遙散可在一定程度上調(diào)節(jié)上述中樞組