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1、目的皮膚衰老是一個(gè)漫長(zhǎng)而復(fù)雜的演變過(guò)程,其主要表現(xiàn)為皮膚形態(tài)及功能上的改變。皮膚免疫系統(tǒng)功能失調(diào)不僅是皮膚衰老的結(jié)果,同時(shí)也是導(dǎo)致皮膚衰老的重要原因之一。中醫(yī)理論體系中的衛(wèi)氣具有護(hù)衛(wèi)肌表、溫分肉、肥腠理、充肌膚、司開闔的功能?,F(xiàn)代研究表明,衛(wèi)氣的這些功能及其分布、運(yùn)行的節(jié)律與機(jī)體免疫系統(tǒng)及為相似,二者之間關(guān)系密切,且由于衛(wèi)氣與皮膚免疫系統(tǒng)中的郎格罕氏細(xì)胞在分布及功能上具有一致性,可見衛(wèi)氣與皮膚免疫系統(tǒng)具有相關(guān)性,故衛(wèi)氣與皮膚衰老間有著密
2、切的聯(lián)系。因此,本課題擬通過(guò)觀察益氣固表經(jīng)典方劑玉屏風(fēng)散對(duì)亞急性皮膚衰老模型小鼠皮膚免疫系統(tǒng)、抗氧化系統(tǒng)及膠原含量的影向,探討衛(wèi)氣虛與皮膚衰老之間的聯(lián)系,及補(bǔ)益衛(wèi)氣對(duì)延緩皮膚衰老的作用及相關(guān)機(jī)理。 方法本實(shí)驗(yàn)中將2月齡的昆明種小鼠隨機(jī)分為5組:正常組、模型組、維生素E-C合劑組、玉屏風(fēng)散大劑量組、玉屏風(fēng)散小劑量組。采用連續(xù)頸部皮下注射12.5%D-半乳糖(1000mg·kg-1),每日一次,連續(xù)六周,復(fù)制亞急性皮膚衰老小鼠模型。
3、同時(shí)玉屏風(fēng)散大劑量組予以玉屏風(fēng)散水煎劑灌胃(18g·kg-1),玉屏風(fēng)散小劑量組予以玉屏風(fēng)散水煎劑灌胃(9g·kg-1),維生素E-C合劑組予以維生素E-C懸液灌胃(50mg·kg-1),其余各組給予等量生理鹽水灌胃,每日一次。六周后,取小鼠背部皮膚,用透射電鏡觀察皮膚中郎格罕氏細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化,并通過(guò)黃嘌呤氧化酶法測(cè)定皮膚中超氧化物岐化酶(superoxidedismutase,SOD)的活性,采用硫代巴比妥酸(Thibabitur
4、icAcid,TBA)法測(cè)定皮膚中丙二醛(MaleicDialdehyde,MDA)的含量,用堿水解法測(cè)定皮膚羥脯氨酸(Hydroxyproline,Hpy)的含量。 結(jié)果1、玉屏風(fēng)散能抑制皮膚郎格罕氏細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變:本實(shí)驗(yàn)中所復(fù)制的亞急性皮膚衰老模型小鼠郎格罕氏細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)較之正常小鼠發(fā)生了明顯的變化。模型組郎格罕氏細(xì)胞細(xì)胞胞膜不完整,胞質(zhì)內(nèi)線粒體,腫脹、嵴變短、減少或消失,甚至形成空泡,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹,空泡樣變,內(nèi)質(zhì)網(wǎng),Go
5、lgi復(fù)合體明顯減少,Birbeck顆粒量少。而同時(shí)給予玉屏風(fēng)散及維生素E-C合劑的各組的小鼠郎格罕氏細(xì)胞結(jié)構(gòu)改變程度明顯小于模型組,其胞膜完整,細(xì)胞核成分葉狀,胞質(zhì)內(nèi)雖可見線粒體腫脹,脊排列稍亂,空泡樣變,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹,但程度較模型組明顯減輕,且Birbeck顆粒量增加,內(nèi)質(zhì)網(wǎng),Golgi復(fù)合體數(shù)量較模型組明顯增多。 2玉屏風(fēng)散能提高皮膚SOD活性、減少皮膚MDA含量,增加皮膚羥脯氨酸的含量: 實(shí)驗(yàn)中D-半乳糖誘導(dǎo)的亞急
6、性衰老小鼠皮膚SOD活性降低,MDA含量升高,羥脯氨酸含量降低,與正常組相比具有非常顯著性差異(P<0.01)。玉屏風(fēng)散大、小劑量組及維生素E-C合劑組均能明顯提高小鼠皮膚SOD活性,與模型組比有顯著差異(P<0.01,P<0.05),特別是玉屏風(fēng)散大劑量組和維生素E-C合劑組效佳,與模型組比較有非常顯著性差異(P<0.01),且二者作用相當(dāng)。玉屏風(fēng)散大、小劑量組及維生素E-C合劑組還能降低皮膚MDA的含量,與模型組比有顯著差異(P<0
7、.05)。此外,與模型組相比,維生素E-C合劑組及玉屏風(fēng)散大、小劑量組小鼠皮膚羥脯氨酸含量明顯增加,對(duì)比有非常顯著差異(P<0.01),且大劑量組作用明顯優(yōu)于維生素E-C合劑組,與維生素E-C合劑組比較有顯著性差異(P<0.05)。 結(jié)論衛(wèi)氣虛是皮膚衰老的基本病機(jī)之一,通過(guò)補(bǔ)益衛(wèi)氣可以抑制亞急性皮膚衰老模型小鼠皮膚郎格罕氏細(xì)胞結(jié)構(gòu)的改變,防止郎格罕氏細(xì)胞出現(xiàn)功能異常;并能提高皮膚抗氧化能力,減輕氧自由基及過(guò)氧化產(chǎn)物對(duì)機(jī)體組織及機(jī)
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