衛(wèi)氣與神經(jīng)傳導相關性的理論和實驗研究.pdf

1、目的：建立衛(wèi)氣虛大鼠模型，選擇益氣固表之玉屏風散制劑以治療方式或預防方式作用于模型動物，觀察動物造模及干預后在神經(jīng)免疫、神經(jīng)營養(yǎng)及神經(jīng)遞質方面的改變。根據(jù)實驗結果，闡釋衛(wèi)氣與神經(jīng)傳導之間的聯(lián)系，明確衛(wèi)氣與神經(jīng)傳導相關的具體環(huán)節(jié)，從神經(jīng)傳導角度初步探討衛(wèi)氣實現(xiàn)其生理功能的可能機制，為衛(wèi)氣的感傳作用提供實驗依據(jù)，為氣脈理論作初步探索，豐富和充實中醫(yī)的衛(wèi)氣學說和絡脈學說內(nèi)容。比較玉屏風散的治療功效和預防功效，探討益氣固表之玉屏風散對衛(wèi)氣虛證的

2、神經(jīng)傳導功能方面的影響，為玉屏風散臨床運用范圍的擴展提供依據(jù)。 方法：理論研究以中醫(yī)學衛(wèi)氣理論及絡脈理論為基礎，闡釋衛(wèi)氣的內(nèi)涵，并對神經(jīng)傳導的認識進行了分析。從衛(wèi)氣的生成、運行、功能三個方面與神經(jīng)傳導相比較，論證了衛(wèi)氣與神經(jīng)傳導的密切聯(lián)系。實驗研究：清潔級SD大鼠，200-250g，72只，隨機分為6組：正常組、衛(wèi)氣虛模型組、低免疫對照組、模型預防組、模型治療組及低免疫治療組。衛(wèi)氣虛模型組、模型預防組、模型治療組大鼠進行寒、熱交

3、替刺激實驗：先將各組大鼠分次放入特制鐵絲籠中，每籠6只，將籠子放入-20±1℃冰柜中20min，每隔10min觀察一次。取出動物后，放常規(guī)飼養(yǎng)室飼養(yǎng)(室溫25±1℃)，4h后進行溫熱刺激。即將各組大鼠分次放入40±1℃恒溫箱中15min，每隔5min觀察一次。取出后常規(guī)飼養(yǎng)。每天寒、熱交替刺激一次，連續(xù)6d。低免疫對照組、低免疫治療組采用低劑量腹腔注射環(huán)磷酰胺10mg/kg·d連續(xù)6d，造成免疫功能低下大鼠模型。正常組和衛(wèi)氣虛模型組、低

4、免疫對照組：造模結束之日起灌服生理鹽水，連續(xù)7天。模型預防組：造模之日起以玉屏風散沖劑灌胃1g/kg.d，連續(xù)7天。模型治療組、低免疫治療組：造模結束之日起以玉屏風散沖劑灌胃1g/kg.d，連續(xù)7天。灌胃結束之日摘眼球取大鼠血清，采取內(nèi)固定法固定大鼠腦組織，取單側坐骨神經(jīng)及腹部皮膚。ELISA法測血清IL-2，血清及坐骨神經(jīng)NGF含量；免疫組化染色檢測皮膚及腦組織中P物質含量，腦組織的細胞凋亡。 結果：衛(wèi)氣虛模型組血清IL-2含

5、量較正常組升高，有非常顯著性差異(P＜0.01)，與低免疫對照組比較無顯著性差異(P＞0.05)，提示衛(wèi)氣虛模型具有免疫功能的變化；模型治療組、模型預防組血清IL-2較衛(wèi)氣虛模型組降低，差異有非常顯著性(P＜0.01)，模型預防組較模型治療組血清IL-2降低，有非常顯著性差異(P＜0.01)，提示玉屏風散對衛(wèi)氣虛有治療作用，同時玉屏風散的預防作用有更好的療效。衛(wèi)氣虛模型組血清NGF高于正常組，但無統(tǒng)計學意義；模型預防組血清NGF與衛(wèi)氣虛

6、模型組、低免疫對照組、低免疫治療組比較有非常顯著性差異(P＜0.01)，與正常組比較有顯著性差異(P＜0.05)；模型治療組血清NGF與正常組、低免疫治療組比較均有顯著性差異(P＜0.05)，與衛(wèi)氣虛模型組、低免疫對照組比較有非常顯著性差異(P＜0.01)；模型預防組血清NGF水平低于模型治療組，但差異無統(tǒng)計學意義，說明玉屏風散的治療和預防能夠降低衛(wèi)氣虛模型的血清NGF水平。坐骨神經(jīng)中的NGF水平變化與血清中的NGF水平變化并不同步，衛(wèi)

7、氣虛模型組坐骨神經(jīng)中的NGF含量較其它組低，與正常組比較有非常顯著性差異(P＜0.01)，與模型預防組比較有顯著性差異(P＜0.05)，提示衛(wèi)氣虛模型的周圍神經(jīng)中NGF含量下降，玉屏風散的預防作用可以防止此種變化。正常組、衛(wèi)氣虛模型組、模型治療組、模型預防組、低免疫對照組及低免疫治療組大鼠的腹部皮膚切片中皆可以見到棕黃色P物質陽性染色區(qū)域。衛(wèi)氣虛模型組與低免疫對照組皮膚組織中P物質陽性染色面積較正常組減少，有顯著性差異(P＜0.05)，

8、提示衛(wèi)氣虛損可引起皮膚P物質含量減少，此種變化可能與機體免疫機能降低有關。衛(wèi)氣虛模型腦組織中額葉皮質P物質陽性細胞計數(shù)低于正常組，有非常顯著性差異(P＜0.01)，與模型預防組和模型治療組比較有顯著性差異(P＜0.05)，同時正常組與低免疫對照組比較有顯著性差異(P＜0.05)，提示衛(wèi)氣虛模型可以降低大腦額葉皮質中P物質含量，玉屏風散的治療和預防干預可以升高衛(wèi)氣虛模型腦組織中的P物質含量。低免疫對照組較正常組陽性細胞計數(shù)低，提示腦組織中

9、的P物質改變與免疫狀態(tài)相關。各組大腦額葉皮質中皆可見棕黃色TUNEL陽性細胞染色區(qū)域，其中衛(wèi)氣虛模型組TUNEL陽性細胞計數(shù)較正常組增加，有非常顯著性差異(P＜0.01)，模型預防組TUNEL陽性細胞計數(shù)較衛(wèi)虛組減少，有顯著性差異(P＜0.05)，提示衛(wèi)氣虛變化可促進腦組織細胞的凋亡，而玉屏風散則可遏制此種變化。 結論：通過寒熱交替刺激制作的衛(wèi)氣虛模型具有免疫力低下的特征，符合衛(wèi)氣虛的微觀辨證特點，同時發(fā)生了神經(jīng)傳導功能的改變，

10、包括坐骨神經(jīng)中NGF的降低，皮膚及腦組織中P物質的減少以及腦細胞凋亡的增加，說明衛(wèi)氣虛證候，不僅有著免疫功能的低下，也有神經(jīng)系統(tǒng)功能的改變，證明了衛(wèi)氣除了共識的衛(wèi)外免疫功能外還具有感應傳導信息的功能，衛(wèi)氣與神經(jīng)傳導相關。益氣固表的玉屏風散不僅能夠改善低下的免疫力從而治療衛(wèi)氣虛之證，還能通過影響血清及坐骨神經(jīng)中NGF水平，影響皮膚及腦組織中P物質的含量以及腦組織中的細胞凋亡等途徑來改善衛(wèi)氣虛所致的感應傳導障礙。預防性地使用玉屏風散較玉屏風