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1、目的: 1.觀察腦心通對(duì)SHR心臟及血管結(jié)構(gòu)的影響。 2.觀察腦心通對(duì)SHR心臟、血管不同組織中細(xì)胞膜上鈣通道:L型鈣通道(Cav αlC),及肌漿網(wǎng)鈣通道相關(guān)蛋白:肌漿網(wǎng)Ca<'2+>-ATP酶(SERCA),肌漿網(wǎng)鈣釋放通道(包括IP<,3>受體通道與Ryanodine受體通道)表達(dá)的影響。探討腦心通對(duì)鈣通道重塑的影響及鈣通道重塑對(duì)心臟、血管重塑的可能作用。 實(shí)驗(yàn)方法 第一部分:選擇12周齡雄性SHR
2、大鼠(二級(jí))32只,隨機(jī)分成4組,腦心通大劑量組(NH,1.5 g.kg<'-1>.d<'-1>)、腦心通小劑量組(NL,0.5 g.kg<'-1>.d<'-1>)、氯沙坦組(LOS,30 mg.kg<'-1>.d<'-1>)和SHR組(SHR)。以及周齡、性別相匹配的 Wistar Kyoto(WKY)大鼠8只。每日灌胃給藥,對(duì)照組給等量蒸餾水。給藥前用尾袖法測(cè)定動(dòng)脈血壓。給藥12周后再次用尾袖法測(cè)定動(dòng)脈血壓,稱重后處死。(1)計(jì)算左
3、心室重量與體重比(LVM/BW)。(2)天狼星紅染色,計(jì)算機(jī)圖像分析計(jì)算心肌膠原容積分?jǐn)?shù)。(3)HE染色,計(jì)算機(jī)圖像分析計(jì)算主動(dòng)脈及腸系膜三級(jí)動(dòng)脈血管壁腔比。 第二部分:采用RT-PCR法測(cè)定各組大鼠心肌及胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 L-VOCC(Cav α lC),SERCA-2a,IP<,3>R-1,RyR-3 mRNA的表達(dá);Western Blot法或免疫組化法測(cè)定蛋白的表達(dá)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 第一部分: 1.
4、大、小劑量腦心通治療后,兩組SHR的SBP均顯著低于SHR組(P<0.01vs SHR),且兩組間比較無(wú)顯著性差別。大劑量腦心通組SHR治療后SBP較治療前明顯降低(P<0.01 vs治療前),而小劑量組治療前后SBP比較無(wú)顯著性差別。 2.大、小劑量腦心通組SHR心肌膠原纖維含量顯著低于SHR組(P<0.01 vsSHR),且兩組間比較無(wú)顯著性差別。 3.與SHR組相比,大、小劑量腦心通均能顯著降低主動(dòng)脈血管的壁腔比(
5、P<0.01 vs SHR),且兩組間比較無(wú)顯著性差別。 4.與SHR組相比,小劑量腦心通治療對(duì)腸系膜三級(jí)動(dòng)脈血管的壁腔比無(wú)影響,而大劑量腦心通顯著降低腸系膜三級(jí)動(dòng)脈血管的壁腔比(P<0.01 vs SHR)。 第二部分: 1.與SHR組相比,大劑量腦心通組心肌組織Cav α lC mRNA轉(zhuǎn)錄水平及蛋白表達(dá)明顯降低(P<0.05 vs SHR)。 2.心肌組織SERCA-2a mRNA及蛋白表達(dá)在大、小
6、劑量組中均較SHR組明顯降低(P<0.01 vs SHR),且兩組間比較無(wú)顯著性差別。 3.與SHR組相比,大、小劑量組心肌RyR-3轉(zhuǎn)錄水平均顯著降低(P<0.01 vsSHR),且兩組間比較無(wú)顯著性差別。 4.腦心通對(duì)SHR心肌IPaR-1 mRNA的表達(dá)無(wú)明顯影響。 5.在胸主動(dòng)脈平滑肌中,腦心通對(duì)上述指標(biāo)均無(wú)明顯影響。 結(jié)論: 1.腦心通可以抑制SHR大鼠血壓的發(fā)展。 2.腦心通可
7、以抑制SHR大鼠的心肌纖維化,改善高血壓所致的心肌重塑。 3.腦心通能明顯減輕SHR血管肥厚。 4.SHR心肌及胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞存在L型鈣通道(CaV α lC)、SERCA-2a、 IP<,3>R-1、RyR-3鈣調(diào)節(jié)蛋白表達(dá)的異常。 5.SHR心肌鈣調(diào)節(jié)蛋白失調(diào)可能是心肌肥厚和纖維化的重要因素之一。 6.腦心通具有改善心肌細(xì)胞L型鈣通道(Cav α lC)、SERCA-2a、RyR-3鈣離子通道重塑
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