大膠質細胞活化在急性高眼壓視網膜突觸可塑性中的作用.pdf

1、中圖分類號Q!墨窆UDC570博士學位論文學校代碼!Q三三密級公玨大膠質細胞活化在急性高眼壓視網膜突觸可塑性中的作用Therolesofreactivemacroglialcellsinretinalsynapticplasticityfollowingacutehighintraocularpressure作者姓名：學科專業(yè)：研究方向：學院(系、所)：指導教師：躉lJ指導教師：周利紅生物學神經生物學基礎醫(yī)學院黃菊芳陳旦論文答辯日期竺!

2、：!：蘭答辯委員會主席‘藝垂!型墾≥中南大學2013年5月大膠質細胞活化在急性高眼壓視網膜突觸可塑性中的作用摘要目的探討急性高眼壓損傷對大鼠視網膜突觸的影響以及大膠質細胞在急性高眼壓損傷后視網膜突觸改變中的調控作用及其可能的分子機制。方法大鼠左眼前房穿刺加壓注射無菌生理鹽水至眼內壓升高至110mmHg，維持1小時，制作急性高眼壓動物模型。動物分別存活2小時，6小時，12小時，1天，3天，7天和14天。右眼設為正常對照組。免疫熒光組織化學

3、檢測視網膜內突觸前終末標記物突觸囊泡素(synaptophysin，SYN)與突觸后標記物突觸相關蛋白102(synapseassociatedprotein102，SAP102)的表達變化。Westernblot檢測視網膜內SYN的蛋白改變。用PKCa、rhodopsin、paravalbumin以及calbindin分別標記視網膜內的雙極細胞、視桿細胞、無長突細胞和水平細胞，檢測其與SYN的免疫熒光組織化學雙標。RTPCR、west

4、ernblot及免疫熒光組織化學檢測視網膜內大膠質細胞活化的標記物GFAP的表達變化。促突觸發(fā)生因子TSPl／2及其受體a261在健康成年大鼠視網膜內的分布和細胞定位采用免疫雙標法進行測定，急性高眼壓損傷后其表達變化也進行了檢測。急性高眼壓動物模型制備成功后，分別給予玻璃體腔注射膠質細胞代謝抑制劑氟代檸檬酸或腹腔注射促突觸發(fā)生因子TSPl／2一a261的拮抗劑gabapentin，觀察視網膜內GFAP、SYN以及TSPl／2的表達變化。

5、結果1急性高眼壓損傷誘導視網膜內SYN表達呈現明顯的時空趨勢。急性高眼壓1天內，SYN在內網層表達增多，而3天后SYN在外網層分布增寬增粗，7天時達到高峰，增寬的SYN延伸到正常情況下無表達的外核層的內側部分。急性高眼壓后視網膜內SAPl02的熒光強度及分布模式均未發(fā)生明顯改變，與SYN的時空表達模式無明顯相關。2急性高眼壓損傷后，視網膜內PKCa陽性的雙極細胞的在內網層突起增多，胞體染色增強，與SYN在內網層內側明顯雙標，而SYN在外