黔產(chǎn)SNT提取物的制備及保肝活性研究.pdf

1、本研究分為二部分：
　　 第一部分、黔產(chǎn)SNT提取物的制備
　　 目的：(1)研究黔產(chǎn)SNT的提取工藝，并對其提取工藝進行優(yōu)化，確定黔產(chǎn)SNT的最佳提取工藝參數(shù)，制備其提取物，包括總提取物、水洗脫物、乙醇洗脫物等;(2)對SNT提取物，包括總提取物、水洗脫物、乙醇洗脫物進行定性分析。
　　 方法：(1)采用溶劑回流加熱法進行提取。在單因素試驗的基礎(chǔ)上，以提取次數(shù)、提取時間、料液比和浸泡時間等因素安排正交試驗，以質(zhì)

2、量提取率為指標，優(yōu)選黔產(chǎn)SNT提取的最佳工藝;(2)采用理化分析方法對提取物，包括總提取物、水洗脫物、乙醇洗脫物等進行初步定性分析。
　　 結(jié)果：(1)提取的最佳工藝為:提取時間為2小時，提取次數(shù)為3次，料液比為1:30，浸泡時間為2小時;(2)經(jīng)過初步定性反應(yīng)確認總提取物含有氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、生物堿、甾體或三萜類、黃酮、皂苷、多糖、還原糖及糖苷、香豆素及萜類內(nèi)酯化合物、酚類和鞣質(zhì)成分;水洗脫物含有氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、皂苷

3、、多糖、還原糖及糖苷、香豆素及萜類內(nèi)酯化合物;乙醇洗脫物含有氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、生物堿、甾體或三萜類、黃酮、多糖、還原糖及糖苷、酚類和鞣質(zhì)成分。
　　 結(jié)論：溶劑回流加熱法提取黔產(chǎn)SNT的正交試驗表明:影響提取的主要因素為提取次數(shù)、料液比、其次為提取時間、浸泡時間。最佳組合為A3B2C3D3。通過驗證試驗證明此組合質(zhì)量提取率高，說明優(yōu)選出來的參數(shù)較為可行、穩(wěn)定。
　　 第二部分、黔產(chǎn)植物SNT提取物對急性肝損傷小鼠的保

4、護作用
　　 目的：探討SNT提取物(總提取物、水洗物、醇洗物)對四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷的保護作用并初探其作用機制。
　　 方法：昆明種小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，根據(jù)實驗需要隨機分成正常對照組、模型組、陽性對照藥聯(lián)苯雙酯(150mg/kg)組、總提物高劑量(1g/kg)組、總提物低劑量(0.5g/kg)組、水洗物高劑量(1g/kg)組、水洗物低劑量(0.5g/kg)組、醇洗物高劑量((1g/kg-1)組、醇

5、洗物低劑量(0.5g/kg-1)組。小鼠灌胃(ig)給藥，連續(xù)7d，每天一次，正常組和模型組灌胃(ig)等量生理鹽水。各組小鼠最后一次給藥30 min后，模型組和給藥組小鼠均腹腔注射(ip)0.15％ CCl4菜油溶液(10 ml/kg)，正常對照組腹腔注射(ip)等量生理鹽水。20h后，小鼠眼球取血，拉頸處死，迅速解剖分離肝臟。制備血清檢測谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、腫瘤壞死因子(TNF-α)含量；制備小鼠肝組織勻漿，

6、測定肝組織勻漿中脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;計算肝臟的濕重指數(shù);HE染色法觀察肝臟組織的病理變化。
　　 結(jié)果：與正常對照組相比，模型組小鼠血清ALT, AST水平顯著升高(p<0.01)，肝組織SOD活性明顯下降(P<0.01), MDA含量顯著升高(P<0.01)，血清TNF-α含量升高，肝臟濕重指數(shù)顯著升高(P<0.01)。與模型組相比，醇洗物高、低劑量組、總提物高劑量組小鼠血清ALT

7、, AST明顯降低(P<0.05,P<0.01);肝組織MDA降低((P<0.01), SOD活性明顯提高((P<0.01); TNF-α含量明顯降低(P<0.01)，其中以醇洗物高劑量組較為顯著，肝臟濕重指數(shù)明顯降低(P<0.05)。HE染色顯示:模型組小鼠肝細胞出現(xiàn)彌漫性氣球樣變，可見散在小灶性壞死伴炎細胞浸潤，醇洗物、總提物各劑量組肝臟病理變化不同程度的輕于模型組，其中以醇洗物高劑量組肝臟病理變化改善程度較為顯著。