洋金花殺滅魚(yú)類指環(huán)蟲(chóng)的活性成分研究.pdf

1、魚(yú)類體外寄生指環(huán)蟲(chóng)病是危害水產(chǎn)養(yǎng)殖最為嚴(yán)重的寄生蟲(chóng)病害之一。當(dāng)前，國(guó)內(nèi)外防治主要以化學(xué)藥物為主，長(zhǎng)期使用導(dǎo)致指環(huán)蟲(chóng)的抗藥性與日俱增，用藥量增大，治療效果下降，成本提高，甚至還產(chǎn)生致畸、致突變等副作用。因此，開(kāi)發(fā)能替代現(xiàn)有藥品的無(wú)公害、環(huán)保型天然植物源殺蟲(chóng)藥，以及從天然植物中分離殺蟲(chóng)活性成分，進(jìn)而進(jìn)行仿生合成是今后研究的方向和熱點(diǎn)。本研究正是以此為出發(fā)點(diǎn)開(kāi)展了活性植物篩選、成分預(yù)試、殺蟲(chóng)活性成分的跟蹤分離、光譜分析等工作，并取得了以下結(jié)果

2、： 1．具有殺蟲(chóng)活性植物的篩選：通過(guò)藥效試驗(yàn)，檢測(cè)了15種天然植物乙醇提取物對(duì)寄生于金魚(yú)的中型指環(huán)蟲(chóng)的殺滅活性。試驗(yàn)結(jié)果表明：48h內(nèi)，洋金花、蛇床、鴉膽子、檳榔、云南重樓、木通、牛心樸子、吳茱萸和夾竹桃的最高殺蟲(chóng)率均達(dá)70％以上，其中洋金花、蛇床和鴉膽子的最高殺滅率達(dá)到100％，并且這幾種植物對(duì)試驗(yàn)魚(yú)安全性較高；另外，牽牛子、青蒿對(duì)指環(huán)蟲(chóng)有一定殺滅作用，不僅殺蟲(chóng)濃度高，殺蟲(chóng)率也較低，分別為55％、30％。綜合15種植物的殺蟲(chóng)試

3、驗(yàn)效果、藥物毒性以及實(shí)驗(yàn)操作的實(shí)際情況，再結(jié)合陜西當(dāng)?shù)刭Y源情況，選擇洋金花作為研究對(duì)象。 2．洋金花化學(xué)成分預(yù)試與殺蟲(chóng)活性部位篩選：采用試管法對(duì)洋金花化學(xué)成分進(jìn)行預(yù)試。結(jié)果顯示：洋金花以生物堿成分為主，提取物呈弱堿性；用石油醚、氯仿、丙酮、乙酸乙酯、乙醇、蒸餾水六種溶劑對(duì)洋金花進(jìn)行部位提取，采用藥效試驗(yàn)觀察各部位提取物的殺蟲(chóng)活性，結(jié)果表明：洋金花的殺蟲(chóng)活性部位為氯仿提取物濃度為200 mg．L<'-1>(按生藥計(jì))。乙醇提取物和

4、乙酸乙酯提取物也有一定的殺蟲(chóng)作用，殺蟲(chóng)最佳濃度分別為400mg．L<'-1>、250 mg．L<'-1>(按生藥計(jì))時(shí)，最高殺滅率達(dá)85％以上，且金魚(yú)的中毒率較低；石油醚提取物、丙酮提取物和蒸餾水提取物在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)幾乎不具備殺蟲(chóng)作用。所以洋金花的氯仿提取物殺蟲(chóng)活性是洋金花主要?dú)⑾x(chóng)活性部位。 3．洋金花殺蟲(chóng)活性成分的追蹤分離與結(jié)構(gòu)鑒定：采用三級(jí)硅膠柱層析法，一級(jí)柱以氯仿：甲醇為溶劑系統(tǒng)梯度洗脫，對(duì)洋金花的氯仿提取物進(jìn)行分離，得

5、到A—F等6段混合物，藥效試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，C段混合物具有較強(qiáng)的殺蟲(chóng)活性，48h內(nèi)平均殺滅率為95％。二級(jí)柱合并C段化合物以石油醚：乙酸乙酯為溶劑系統(tǒng)進(jìn)行柱層析分離純化，得到C1一C7段混合物，藥效試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，C6段混合物具有突出的殺蟲(chóng)活性，48h內(nèi)的平均殺滅率大于95％。三級(jí)柱合并C5、C6和C7段化合物，以石油醚：乙酸乙酯的比例為1.5：1恒定極性洗脫系統(tǒng)對(duì)C6段進(jìn)行分離，得到三種化合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ，藥效試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，化合物Ⅱ 48h內(nèi)的平均殺滅率