肝硬化患者腸道微生態(tài)研究：從結(jié)構(gòu)到功能.pdf

1、肝硬化是我國消化系統(tǒng)常見疾病，患者常死于如上消化道出血、自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎等各種并發(fā)癥。腸道與肝臟通過“腸-肝軸”密切關(guān)聯(lián)。肝硬化時腸道微環(huán)境常因肝臟功能損害和門脈高壓受到直接和間接的影響。研究表明腸道細(xì)菌移位參與肝硬化各種并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展。肝硬化狀態(tài)下腸道細(xì)菌移位發(fā)生主要與三方面因素有關(guān):腸道細(xì)菌過度生長、腸壁通透性增加以及機體免疫力下降。以往對于肝硬化腸道菌群結(jié)構(gòu)研究多依賴細(xì)菌培養(yǎng)法。然而很多腸道細(xì)菌無法在體外分離培養(yǎng)，因此無法從整

2、體對腸道菌群結(jié)構(gòu)進行分析。近年來，越來越多的腸道菌群研究依賴非培養(yǎng)的分子生態(tài)學(xué)方法進行，這些方法能夠更好的反映腸道菌群群落多樣性特點，為理解腸道菌群在肝硬化病理機制中的作用提供依據(jù)。為了全面分析肝硬化腸道微生態(tài)失衡情況，本研究擬利用分子生態(tài)學(xué)方法對肝硬化患者腸道菌群進行結(jié)構(gòu)和功能兩方面研究。
　　方法
　　本研究以酒精性肝硬化患者、乙肝肝硬化患者及健康對照個體為研究對象，利用基于16S rRNA的454高通量測序和熒光定量P

3、CR法分析患者腸道菌群群落結(jié)構(gòu)特點，同時利用微生物功能基因芯片GeoChip分析患者腸道微生物功能基因多樣性，從結(jié)構(gòu)到功能對肝硬化患者腸道微生態(tài)進行全面分析，并探討肝硬化不同病因?qū)δc道菌群的影響。
　　結(jié)果
　　1.從群落結(jié)構(gòu)上來看，肝硬化患者糞便菌群結(jié)構(gòu)與健康對照存在明顯差異。在門的水平上，肝硬化患者腸道菌群中類桿菌門細(xì)菌比例明顯下降，而變形菌門和梭桿菌門細(xì)菌比例顯著增加。在科的水平上，與健康對照組相比，肝硬化患者腸道菌群

4、中腸桿菌科、韋榮球菌科和鏈球菌科細(xì)菌明顯增加，毛螺菌科細(xì)菌比例明顯下降。腸道鏈球菌科細(xì)菌比例與肝硬化Child-Pugh評分呈正相關(guān)，毛螺菌科細(xì)菌比例與Child-Pugh評分呈負(fù)相關(guān)。鏈球菌等潛在致病菌在肝硬化患者腸道中顯著增加，可能與肝硬化并發(fā)感染等密切相關(guān)。
　　2.從功能結(jié)構(gòu)看，肝硬化患者腸道菌群涉及營養(yǎng)物質(zhì)代謝通路的功能基因顯著缺失，如氨基酸合成和代謝基因，脂類代謝基因、輔因子合成代謝基因等較正常對照組明顯減少。腸道菌群

5、營養(yǎng)物質(zhì)分解潛力下降可能與肝硬化營養(yǎng)不良發(fā)生相關(guān)。
　　3.在群落結(jié)構(gòu)上，酒精性肝硬化與乙肝肝硬化患者相比差異較小，主要表現(xiàn)為酒精性肝硬化患者普雷沃菌科細(xì)菌比例顯著增加。在功能結(jié)構(gòu)上，酒精性肝硬化與乙肝肝硬化患者相比差異顯著，酒精性肝硬化腸道微生物富集了很多涉及重金屬降解、有機污染物降解、應(yīng)激反應(yīng)、毒力等通路的功能基因。因此長期大量飲酒可能主要在功能層面對菌群產(chǎn)生影響。
　　結(jié)論
　　肝硬化患者菌群群落結(jié)構(gòu)及功能結(jié)構(gòu)都