肝硬化患者腸道微生態(tài)研究：從結構到功能.pdf

1、肝硬化是我國消化系統常見疾病，患者常死于如上消化道出血、自發(fā)性細菌性腹膜炎等各種并發(fā)癥。腸道與肝臟通過“腸-肝軸”密切關聯。肝硬化時腸道微環(huán)境常因肝臟功能損害和門脈高壓受到直接和間接的影響。研究表明腸道細菌移位參與肝硬化各種并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展。肝硬化狀態(tài)下腸道細菌移位發(fā)生主要與三方面因素有關:腸道細菌過度生長、腸壁通透性增加以及機體免疫力下降。以往對于肝硬化腸道菌群結構研究多依賴細菌培養(yǎng)法。然而很多腸道細菌無法在體外分離培養(yǎng)，因此無法從整

2、體對腸道菌群結構進行分析。近年來，越來越多的腸道菌群研究依賴非培養(yǎng)的分子生態(tài)學方法進行，這些方法能夠更好的反映腸道菌群群落多樣性特點，為理解腸道菌群在肝硬化病理機制中的作用提供依據。為了全面分析肝硬化腸道微生態(tài)失衡情況，本研究擬利用分子生態(tài)學方法對肝硬化患者腸道菌群進行結構和功能兩方面研究。
　　方法
　　本研究以酒精性肝硬化患者、乙肝肝硬化患者及健康對照個體為研究對象，利用基于16S rRNA的454高通量測序和熒光定量P

3、CR法分析患者腸道菌群群落結構特點，同時利用微生物功能基因芯片GeoChip分析患者腸道微生物功能基因多樣性，從結構到功能對肝硬化患者腸道微生態(tài)進行全面分析，并探討肝硬化不同病因對腸道菌群的影響。
　　結果
　　1.從群落結構上來看，肝硬化患者糞便菌群結構與健康對照存在明顯差異。在門的水平上，肝硬化患者腸道菌群中類桿菌門細菌比例明顯下降，而變形菌門和梭桿菌門細菌比例顯著增加。在科的水平上，與健康對照組相比，肝硬化患者腸道菌群

4、中腸桿菌科、韋榮球菌科和鏈球菌科細菌明顯增加，毛螺菌科細菌比例明顯下降。腸道鏈球菌科細菌比例與肝硬化Child-Pugh評分呈正相關，毛螺菌科細菌比例與Child-Pugh評分呈負相關。鏈球菌等潛在致病菌在肝硬化患者腸道中顯著增加，可能與肝硬化并發(fā)感染等密切相關。
　　2.從功能結構看，肝硬化患者腸道菌群涉及營養(yǎng)物質代謝通路的功能基因顯著缺失，如氨基酸合成和代謝基因，脂類代謝基因、輔因子合成代謝基因等較正常對照組明顯減少。腸道菌群

5、營養(yǎng)物質分解潛力下降可能與肝硬化營養(yǎng)不良發(fā)生相關。
　　3.在群落結構上，酒精性肝硬化與乙肝肝硬化患者相比差異較小，主要表現為酒精性肝硬化患者普雷沃菌科細菌比例顯著增加。在功能結構上，酒精性肝硬化與乙肝肝硬化患者相比差異顯著，酒精性肝硬化腸道微生物富集了很多涉及重金屬降解、有機污染物降解、應激反應、毒力等通路的功能基因。因此長期大量飲酒可能主要在功能層面對菌群產生影響。
　　結論
　　肝硬化患者菌群群落結構及功能結構都