枸杞多糖對(duì)大劑量化療后小鼠睪丸生精功能的影響.pdf

1、目前臨床上治療腫瘤和一些免疫系統(tǒng)疾病時(shí),采用大劑量放療或在應(yīng)用大劑量化療藥物時(shí),在機(jī)體“容忍”的劑量下,部分受者睪丸內(nèi)的SSCs破壞嚴(yán)重,甚至殆盡,致非梗阻性無(wú)精子癥形成。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展,青春期前腫瘤患者的臨床治愈率已超過(guò)70％,但這些腫瘤治愈的患者中有15%需長(zhǎng)期面對(duì)由化療或放療所引起的不育問(wèn)題。然而,對(duì)于青春期前的淋巴瘤或白血病、精索靜脈曲張以及腮腺源性睪丸炎等生精功能阻滯的非梗阻性無(wú)精子癥患者,目前醫(yī)學(xué)尚無(wú)有效的治療方法。枸杞

2、多糖(Lyciumbarbarumpolysaccharides,LBP)是枸杞生物活性功能的主要有效成分。近代藥理實(shí)驗(yàn)表明,LBP具有免疫調(diào)節(jié)、抗衰老、降血脂、降血糖、護(hù)肝、防輻射、抗疲勞、保護(hù)生殖系統(tǒng)、抗腫瘤、抗缺氧等功能。在保護(hù)生殖系統(tǒng)方面,有研究表明LBP對(duì)生精細(xì)胞具有一定的保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)擬用白消安建立大劑量化療致小鼠不育模型,并給予LBP治療,以c-kit為觀察指標(biāo)檢測(cè)其生精功能恢復(fù)情況,研究LBP對(duì)大劑量化療后小鼠睪丸c-

3、kit因子表達(dá)的影響,進(jìn)一步探尋因大劑量化療所致不育新的治療方法。
　　目的：探討枸杞多糖(Lyciumbarbarumpolysaccharides,LBP)對(duì)大劑量化療后小鼠睪丸生精功能的影響。
　　方法：4~6周齡雄性昆明白(KM)小鼠50只,隨機(jī)分為化療+生理鹽水組(模型組)、化療+50mg/kg·d-1LBP組、化療+100mg/kg·d-1LBP組、化療+200mg/kg·d-1LBP組(即3個(gè)治療組)和正常對(duì)照

4、組,每組10只。觀察動(dòng)物的一般狀況,HE染色檢測(cè)模型的建立情況,采用免疫組化、實(shí)時(shí)熒光定量PCR以及Western-blot免疫印跡法檢測(cè)分析LBP對(duì)各實(shí)驗(yàn)組小鼠睪丸c-kit因子表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：HE染色發(fā)現(xiàn)造模成功的小鼠生精小管內(nèi)細(xì)胞層數(shù)減少,多數(shù)僅存支持細(xì)胞,管腔呈空泡樣變。免疫組化結(jié)果:c-kit在化療+生理鹽水組與化療+50mg/kg·d-1LBP組中低表達(dá),而在化療+100mg/kg·d-1LBP組、化療+200

5、mg/kg·d-1LBP組及正常對(duì)照組中則高表達(dá)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果:化療+生理鹽水組、化療+50mg/kg·d-1LBP組、化療+100mg/kg·d-1LBP組、化療+200mg/kg·d-1LBP組、正常對(duì)照組的c-kitmRNA相對(duì)表達(dá)量分別為(5.94±0.11)、(8.58±0.27)、(15.05±0.35)、(15.06±0.21)、(15.27±0.13)。Western-blot免疫印跡法檢測(cè)結(jié)果:化療+生理

6、鹽水組、化療+50mg/kg·d-1LBP組、化療+100mg/kg·d-1LBP組、化療+200mg/kg·d-1LBP組、正常對(duì)照組的c-kit蛋白相對(duì)表達(dá)量分別為(0.48±0.03)、(0.55±0.03)、(1.03±0.06)、(1.08±0.02)、(1.09±0.02)。通過(guò)分析發(fā)現(xiàn)模型組(化療+生理鹽水組)較正常對(duì)照組c-kit因子的表達(dá)有明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);用LBP治療的三個(gè)組較模型組c-ki