太空育種對(duì)喜樹(shù)內(nèi)生真菌合成代謝及生長(zhǎng)發(fā)育特性的影響.pdf

1、喜樹(shù)為山茱萸目珙桐科喬木植物,是我國(guó)特有的一種高大落葉喬木,廣泛分布于長(zhǎng)江流域及西南各省區(qū)。1966年美國(guó)的Monroe E.Wall首次從喜樹(shù)莖的提取物中分離出喜樹(shù)堿,隨后人們研究發(fā)現(xiàn)喜樹(shù)堿對(duì)胃腸道腫瘤、膀胱癌、肝癌和白血病等惡性腫瘤均有一定療效。喜樹(shù)堿的獨(dú)特抗癌活性機(jī)制掀起了喜樹(shù)與喜樹(shù)堿研究的高潮。
　　 本文對(duì)湖南張家界喜樹(shù)開(kāi)展了內(nèi)生真菌的分離、篩選和產(chǎn)物的抗癌特性研究。目的在于尋找更廣泛喜樹(shù)堿來(lái)源,獲得有效產(chǎn)生喜樹(shù)堿物質(zhì)

2、的目標(biāo)新菌株,同時(shí)開(kāi)發(fā)新的天然藥物,為解決喜樹(shù)堿生產(chǎn)中的一些關(guān)鍵問(wèn)題和最終實(shí)現(xiàn)通過(guò)微生物工程生產(chǎn)該藥物奠定研究基礎(chǔ)。本文從湖南喜樹(shù)皮中分離得到內(nèi)生真菌,通過(guò)液體培養(yǎng)基發(fā)酵后,分離出15株喜樹(shù)菌株,用薄層色譜法(TLC)、高效液相色譜法(HPLC)進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)其中一株的胞外分泌物中含有喜樹(shù)堿,標(biāo)號(hào)EFC I-03,該菌株具有進(jìn)一步研究的價(jià)值。
　　 對(duì)菌株EFC I-03進(jìn)行了太空育種,研究太空育種對(duì)喜樹(shù)內(nèi)生真菌生理特性以及產(chǎn)喜

3、樹(shù)堿能力的影響。試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),接受太空誘變影響的第一代菌株具生長(zhǎng)速度快的優(yōu)勢(shì),但是這優(yōu)勢(shì)不具有可遺傳性,培養(yǎng)的第二、第三代太空菌株在生長(zhǎng)速度上已經(jīng)和地面對(duì)照菌株生長(zhǎng)速度基本同步。并且接受了太空誘變影響的太空菌株在產(chǎn)喜樹(shù)堿能力上并無(wú)明顯提高。
　　 在培養(yǎng)喜樹(shù)內(nèi)生真菌的培養(yǎng)基中添加了KH2PO4、MgSO4和(NH4)2SO4三種鹽,采用三因素三水平的正交試驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化。試驗(yàn)結(jié)果表明,采用4號(hào)方案進(jìn)行培養(yǎng)基的優(yōu)化效果最好,能夠得到最