川芎嗪對(duì)哮喘大鼠Th1-Th2細(xì)胞因子的影響及機(jī)制研究.pdf

1、支氣管哮喘是氣道慢性炎癥性疾病，嗜酸性粒細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞等多種炎癥細(xì)胞和細(xì)胞因子參與這個(gè)病理過程。研究顯示，哮喘患者和動(dòng)物模型的氣道炎癥與Th2型細(xì)胞因子產(chǎn)生增多和Th1細(xì)胞因子產(chǎn)生減少有關(guān)。Th2細(xì)胞可使IgE產(chǎn)生、肥大細(xì)胞增生、嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)而決定哮喘的嚴(yán)重程度，因此，哮喘被認(rèn)為是Th2細(xì)胞驅(qū)動(dòng)的疾病。初始（naive）CD4+T分化為Th1或 Th2細(xì)胞是免疫應(yīng)答的關(guān)鍵過程。研究表明，T-bet和 GATA-3是決定

2、Th1和 Th2細(xì)胞分化的關(guān)鍵性轉(zhuǎn)錄因子。糖皮質(zhì)激素是目前治療哮喘氣道炎癥最有效的藥物，但長(zhǎng)期應(yīng)用會(huì)產(chǎn)生明顯副作用。川芎嗪是中藥川芎根莖中分離出的生物堿，化學(xué)名為2，3，5，6-四甲基吡嗪。川芎嗪具有廣泛的藥理作用，如調(diào)節(jié)免疫、抗血小板聚集、抗氧化、抗炎、抗纖維化和抗腫瘤等，已廣泛應(yīng)用于心腦血管系統(tǒng)疾病的治療；在哮喘治療方面的應(yīng)用也早有報(bào)道，臨床研究證實(shí)川芎嗪治療哮喘效果確切。有研究顯示川芎嗪能抑制哮喘大鼠的氣道炎癥，但其機(jī)制尚不清楚。

3、因此，研究川芎嗪對(duì)哮喘氣道炎癥的影響及相關(guān)機(jī)制，探討其是否能調(diào)節(jié)Th細(xì)胞的分化，如何調(diào)節(jié)，將為其在哮喘防治中的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 第一部分、川芎嗪對(duì)哮喘大鼠氣道炎癥的影響 目的: 探討川芎嗪對(duì)哮喘大鼠氣道炎癥的影響。 方法: 40只SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組（Con組），哮喘模型組（Ast組），哮喘生理鹽水組（Ast-C組），地塞米松組（Dex組），川芎嗪組（Lig組），每組8只。檢測(cè)肺泡灌洗

4、液（BALF）中的細(xì)胞成分，用蘇木素-伊紅（HE）染色觀察肺組織病理學(xué)變化。 結(jié)果: （1）Ast組及Ast-C組大鼠BALF中白細(xì)胞總數(shù)，嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）和中性粒細(xì)胞（N）占總白細(xì)胞的百分比均高于Con組（P<0.05）；而Lig組BALF中細(xì)胞總數(shù)、EOS％和N％均低于Ast組及Ast-C組（P<0.05），但仍高于 Con組（P<0.05）；Dex組細(xì)胞總數(shù)、EOS％、N％和淋巴細(xì)胞占總白細(xì)胞的百分比（L％）

5、均低于Ast組及Ast-C組（P<0.05）。 （2）與Con組相比，Ast組及Ast-C組大鼠支氣管平滑肌肥厚，黏膜充血水腫，并有大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，管腔內(nèi)充滿大量黏液，有黏液栓形成，支氣管壁周圍有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。而Lig組和Dex組大鼠支氣管炎癥性改變則明顯減輕，支氣管壁周圍僅有少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。 結(jié)論: 腹腔注射川芎嗪可抑制卵清蛋白誘導(dǎo)的大鼠氣道炎癥。 第二部分、川芎嗪對(duì)哮喘大鼠Th1/Th2細(xì)胞因子的

6、影響及機(jī)制 目的: 探討腹腔注射川芎嗪對(duì)哮喘大鼠Th1/Th2細(xì)胞因子的影響及機(jī)制。 方法: 40只SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組（Con組），哮喘模型組（Ast組），哮喘生理鹽水組（Ast-C組），地塞米松組（Dex組），川芎嗪組（Lig組），每組8只。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)各組大鼠BALF中 IL-4和IFN-γ的濃度，用免疫組化方法和Westerm blot方法檢測(cè)肺組織GATA-3和T

7、-bet蛋白的表達(dá)。 結(jié)果: （1）與Con組相比，Ast組及Ast-C組BALF中IL-4和肺組織GATA-3水平明顯升高（P<0.05），IFN-γ和T-bet水平明顯減低（P<0.05），IL-4/IFN-γ比值增大（P<0.05）； （2）與Ast及Ast-C組相比，Lig組BALF中IL-4和肺組織GATA-3水平明顯降低（P<0.05），IFN-γ和T-bet水平明顯升高（P<0.05），IL-4/I

8、FN-γ比值減?。≒<0.05），而Dex組IL-4、IFN-γ、GATA-3、T-bet水平和IL-4/IFN-γ比值均降低（P<0.05），IL-4和GATA-3分別比IFN-γ和T-bet減低更明顯。 （3）相關(guān)分析表明，Ast組肺組織GATA-3蛋白表達(dá)與BALF中IL-4濃度呈正相關(guān)（r＝0.86，P<0.05），T-bet與IFN-γ正相關(guān)（r＝0.82，P<0.05）。 結(jié)論: 川芎嗪可通過使哮喘肺