自發(fā)性高血壓大鼠Th1-Th2細胞因子變化的實驗研究.pdf

1、目的：通過對自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)的實驗研究，初步探討自發(fā)性高血壓及其并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展與Th1/Th2細胞因子改變所致免疫偏離或免疫功能紊亂的關系，從而為進一步從免疫學角度探討高血壓病及其并發(fā)癥的發(fā)病機制增添基礎資料，為高血壓病及其并發(fā)癥的預防和治療提供新思路。 方法：選用4周齡、8周齡、12周齡、16周齡SHR各6只為研究對象，以相同周齡、血壓正常的Wister大鼠為實驗對照。斷頭取血分離血清標本，取胸腺和脾臟等稱重，無菌

2、操作制備脾細胞懸液，計數(shù)細胞后定量鋪板進行細胞培養(yǎng)。主要采用ABC-ELISA法檢測血清和脾細胞培養(yǎng)上清中IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-6等Th1/TH2細胞因子水平的變化；并用XTT法測定培養(yǎng)的脾細胞懸液中T細胞的增殖情況，初步探討高血壓及其并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展與Th1/Th2細胞因子改變所致免疫偏離或免疫功能紊亂的關系。 結果：(1)各周齡SHR體重與同周齡Wister大鼠無明顯差別，4周齡SHR血壓略高于W

3、ister大鼠，8周齡后SHR血壓開始較Wister大鼠明顯升高，達152～185mmHg。各周齡SHR的胸腺均大于Wister大鼠，尤其在8、12周齡時增大明顯，到16周才開始萎縮；而Wister大鼠的胸腺則隨著周齡的增加逐漸縮小，在12周時即已明顯萎縮并呈現(xiàn)出灰黃色。SHR和Wister大鼠的脾臟均隨著周齡的增加而增大，在4、8周齡時SHR脾臟的重量明顯大于同齡Wister大鼠。(2)SHR組血清中IFN-γ、TNF-α、IL-2、

4、IL-4、IL-6含量在4周齡時與Wister大鼠對照組比無顯著性差異(P＞0.05)，但在8周SHR各組較同齡Wister鼠均有顯著增加(P＜0.05，P＜0.01)，且8周齡后IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-6有持續(xù)升高趨勢。IFN-γ/IL-4比值隨著SHR周齡和血壓的持續(xù)升高呈增高趨勢。(3)SHR各組的脾細胞在受植物血凝素(PHA)刺激后，培養(yǎng)上清中的IL-2、IL-4含量的升高幅度在4周齡時與Wister大鼠對照組差

5、異不大(P＞0.05)，8周齡時高于Wister大鼠(P＜0.05)，而在12、16周低于同齡Wister大鼠；SHR各組的IL-6含量均略高于Wister大鼠，但無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；IFN-γ則總體變化不大。(4)在SHR血壓升高的初期，即8周齡時，T淋巴細胞受絲裂原PHA刺激后的增殖活性高于對照組wister大鼠(P＜0.05)；但到12、16周，T淋巴細胞對PHA的反應性下降，其增殖活性隨著周齡及血壓的增高呈降低趨勢。

6、 結論：(1)SHR發(fā)病早期，胸腺和脾臟均有增大，提示存在機體免疫功能的亢進；(2)在SHR年齡增長和血壓持續(xù)升高過程中，血清Th1、Th2細胞因子水平均高于同齡Wister大鼠，提示細胞免疫和體液免疫因素均介入高血壓的發(fā)病；IFN-γ/IL-4的比值呈增高趨勢，提示存在Th1/Th2細胞失衡，且隨著病程的發(fā)展可能存在Th2向Th1型反應的免疫偏移；(3)SHR幼年時，脾淋巴細胞對絲裂原PHA刺激的轉(zhuǎn)化/增殖活性較強，提示其對某些