基質(zhì)金屬蛋白酶及CD105在非小細(xì)胞肺癌組織中表達(dá)及意義.pdf

1、原發(fā)性支氣管肺癌簡稱肺癌,是人類最常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)生率和死亡率很高。絕大多數(shù)肺癌起源于支氣管粘膜上皮,故亦稱支氣管肺癌。近60年來,世界各國肺癌的發(fā)病率和病死率均迅速上升,是男性癌癥患者首要原因。臨床上肺癌主要包括非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)和小細(xì)胞肺癌,約80％~85%的肺癌患者屬于NSCLC。
　　NSCLC在肺癌組織分型最為常見,但很多患者確診時己為晚期。肺癌的侵襲

2、與轉(zhuǎn)移是一個復(fù)雜、多步驟、多環(huán)節(jié)的過程,涉及腫瘤細(xì)胞增殖、粘附、運動、降解基膜和細(xì)胞外基質(zhì)等情況。正常肺泡上皮基底膜是由Ⅳ型膠原等成分構(gòu)成,是一致密的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),可固著細(xì)胞不能正常通過。基質(zhì)金屬蛋白酶9(matrix metallo proteinase9,MMP-9)是基質(zhì)金屬蛋白酶家族(matrix metallo proteinases, MMPs)中與降解Ⅳ型膠原有關(guān)的主要酶類,MMP-9和其特異性抑制劑組織金屬蛋白酶抑制劑-1(

3、tissue inhibitors of metalloproteinase-1,TIMP-1)在腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移灶的形成過程中起重要作用。同時,NSCLC又是一個典型的血管依賴性病變,新生血管的形成促進(jìn)了腫瘤的生長、浸潤和轉(zhuǎn)移,研究表明,當(dāng)肺癌組織生長到直徑1~2mm時,其進(jìn)一步生長就需要新的血管生成,而新的血管生成又增加了腫瘤轉(zhuǎn)移的機(jī)會。微血管密度(microvascular denstity,MVD)是衡量腫瘤血管生成的量化指

4、標(biāo),有研究將其作為腫瘤血管形成標(biāo)志來研究與腫瘤的關(guān)系。CD105抗體是目前公認(rèn)較敏感的血管標(biāo)記物,具有染色強(qiáng)、背景清晰、易計數(shù)等優(yōu)點,通過對其進(jìn)行表達(dá)檢測,可顯示腫瘤內(nèi)微血管的數(shù)量及密度,反映腫瘤組織MVD,以MVD值量化腫瘤血管生成情況,從而定量的分析腫瘤微血管增生情況,有研究將MVD檢測做為定量分析腫瘤血管生成的金指標(biāo)。本研究應(yīng)用免疫組化SP法和Western blot法檢測NSCLC及癌旁組織中MMP-9和TIMP-1的表達(dá)情況,

5、應(yīng)用免疫組化SP法檢測NSCLC及癌旁組織中CD105抗體表達(dá)情況,并以其衡量MVD,以期更全面地了解它們在NSCLC中的生物學(xué)作用及其表達(dá)與臨床病理特征的相關(guān)性。
　　目的:(1)探討NSCLC組織中基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)和其特異性抑制劑組織金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)的表達(dá)及其與腫瘤生物學(xué)行為的關(guān)系;(2)探討NSCLC組織中CD105抗體的表達(dá)及微血管密度(MVD)檢查與臨床病理特征的相關(guān)性;(3)探討檢查M

6、MP-9、TIMP-1及CD105抗體在診斷和治療NSCLC的可能意義,試圖尋找NSCLC診斷和預(yù)后判斷有價值的腫瘤標(biāo)記物。
　　方法:收集50例NSCLC蠟塊標(biāo)本和26例手術(shù)后確診為NSCLC標(biāo)本,①肉眼觀察26例術(shù)后確診為NSCLC標(biāo)本組織大體形態(tài)學(xué);②HE染色觀察NSCLC組織和癌旁相應(yīng)正常組織形態(tài)學(xué)改變及與臨床關(guān)系;③應(yīng)用免疫組化SP法檢測76例NSCLC和癌旁正常組織中MMP-9、TIMP-1、CD105抗體的表達(dá),并分

7、析其表達(dá)與肺癌組織類型、腫瘤大小、TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。④Western blot檢測26例手術(shù)標(biāo)本CD105蛋白在NSCLC中的表達(dá);⑤根據(jù)CD105抗體免疫組化結(jié)果,通過計算機(jī)圖像分析研究血管密度與NSCLC腫瘤的關(guān)系;⑥SPSS for Windows13.0統(tǒng)計軟件處理圖像分析數(shù)據(jù)免疫組織化學(xué)平均光密度值和Western blot灰度值,探討檢查MMP-9、TIMP-1及CD105抗體在診斷和治療NSCLC的

8、可能意義。
　　結(jié)果:①26例手術(shù)后確診為NSCLC標(biāo)本中發(fā)生于主支氣管和葉支氣管的中央型(肺門型)16例(61.5%),源于肺段近肺周邊部孤立結(jié)節(jié)的周圍型肺癌9例(34.6%),源于末梢肺組織的彌漫型肺癌1例(3.9%);②HE染色觀察NSCLC組織學(xué)表現(xiàn)復(fù)雜,76例NSCLC鱗狀上皮細(xì)胞癌(鱗癌)45例(59.2%),以中央型肺癌最為常見,尤其老年男性,與吸煙關(guān)系非常密切;76例NSCLC腺癌為31例(40.8%),多為周圍型

9、肺癌,女性患者較多。③MMP-9、TIMP-1及CD105抗體在肺癌組織中的陽性表達(dá)率明顯高于癌旁正常組織(P<0.05)。NSCLC中MMP-9、TIMP-1及CD105抗體表達(dá)與腫瘤的分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有相關(guān)性(P<0.05或P<0.01)。④Western blot結(jié)果顯示,26例NSCLC組織中CD105蛋白表達(dá)明顯高于相應(yīng)的正常的癌旁組織(P<0.05)。⑤通過計算機(jī)圖像分析表明,微血管密度與NSCLC分

10、化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正比,腺癌較鱗癌表達(dá)顯著。
　　結(jié)論:①本地區(qū)NSCLC以中央型(肺門型)為主,其次是周圍型肺癌,彌漫型肺癌較為少見。②HE染色表明,NSCLC癌旁相應(yīng)正常組織(距癌原發(fā)灶10cm以上)可作為正常對照組;NSCLC組織學(xué)表現(xiàn)復(fù)雜,以鱗狀上皮細(xì)胞癌(鱗癌)最為常見,腺癌次之;大細(xì)胞未分化癌(大細(xì)胞癌)少見。③MMP-9、TIMP-1及CD105抗體在NSCLC組織中的陽性表達(dá)率明顯高于癌旁正常組織,且與