竹材木質(zhì)素降解菌的選育.pdf

1、竹纖維是一種前景廣闊的新型綠色環(huán)保纖維,具有一系列其它纖維無法比擬的優(yōu)點,如抗菌性、耐磨性、吸濕性、透氣性。我國竹資源豐富,如果能在紡織領(lǐng)域開發(fā)利用竹材資源,將產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟效益和社會效益。利用微生物對竹纖維原料進行脫膠具有低污染,低成本,低能耗的特點。
　　 本文在木質(zhì)素降解菌的篩選、鑒定、菌株的誘變育種和菌株產(chǎn)酶條件優(yōu)化等幾個方面進行了系統(tǒng)的研究,結(jié)果如下:
　　 以PDA-Azure-B平板上菌落的脫色圈為檢測指標

2、,對20多份土壤、腐殖質(zhì)樣品進行了篩選,得到具有Mnp和Lip酶活力的菌株3株。在此基礎(chǔ)上經(jīng)搖瓶復(fù)篩,最后篩選出了菌株1023號雙酶產(chǎn)量高。利用菌絲干重法測定菌株1023的生長曲線,結(jié)果顯示1023菌株對數(shù)生長中期為70小時。使用Kirk培養(yǎng)基在30℃和140rpm搖瓶培養(yǎng)時,1023菌株在第8天Mnp和Lip酶活力達到了最高峰分別為403 U/L和221 U/L。
　　 用低能N+離子對1023菌株進行誘變處理,在注入能量30

3、KeV,注入劑量為100×1014ions/cm2,真空10-3Pa,電流強度10mA,脈沖10s條件下進行N+注入,通過在選擇培養(yǎng)基上篩選和搖瓶初篩復(fù)篩后再通過繼代遺傳穩(wěn)定性實驗考察,誘變菌N1023j具有較高的產(chǎn)酶穩(wěn)定性,其Mnp酶活力達513 U/L,Lip酶活力為270.9 U/L,較出發(fā)菌株分別提高了27.29％和22.58％。
　　 通過四因素三水平正交實驗對發(fā)酵條件進行優(yōu)化,確定了在培養(yǎng)溫度為35℃,初始pH為5.

4、5,搖瓶裝量為100mL,搖床轉(zhuǎn)速為160rpm時,高產(chǎn)變異株N1023j發(fā)酵有較高的酶活力。優(yōu)化控制條件下進行高產(chǎn)變異株N1023j搖瓶發(fā)酵,Mnp和Lip酶活力分別為631U/L和340 U/L,分別比原發(fā)酵條件下Mnp和Lip酶活提高了22.76％和23.63％。
　　 利用菌株1023和N1023j對粗竹纖維進行微生物脫膠試驗,經(jīng)過30天的處理,1023和N1023j兩株菌對毛竹粗纖維的木質(zhì)素降解率分別為33.19％和4