PPARγ、脂聯(lián)素對(duì)肝纖維化的影響.pdf

1、目的：觀察過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPART)對(duì)大鼠肝星狀細(xì)胞(HSC-T6)生物學(xué)特性、脂聯(lián)素表達(dá)的影響及其抗肝纖維化作用，為PPARγ抗肝纖維化的臨床運(yùn)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：將大鼠肝星狀細(xì)胞株(HSC-T6)用含10％胎牛血清(FBS)的高糖DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)至貼壁，經(jīng)血清饑餓同步24小時(shí)，分成4個(gè)組，即：空白對(duì)照組(用含10％胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng))；羅格列酮(10μmol/L)刺激組；GW9662

2、(1μmol/L)阻斷組；羅格列酮+GW9662組：(10μmol/L羅格列酮+1μmol/LGW9662)。四組分別培養(yǎng)24小時(shí)后，①四甲基偶氮唑鹽比色實(shí)驗(yàn)(MTT)檢測(cè)各組細(xì)胞的增殖情況；②ELISA方法分別檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的脂聯(lián)素(Adiponectin)、Ⅰ型膠原、基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)及基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑2(TIMP2)的含量；③RT-PCR半定量檢測(cè)脂聯(lián)素及PPARγ mRNA表達(dá)；④Westernblot方法檢

3、測(cè)脂聯(lián)素及PPARγ蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：1、MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示羅格列酮組的肝星狀細(xì)胞增殖率較其他組明顯減弱(P<0.01)；2、ELISA結(jié)果發(fā)現(xiàn)羅格列酮組Ⅰ型膠原及MMP2的表達(dá)量較羅格列酮+GW9662組、GW9662組、空白對(duì)照組明顯下降(P<0.01)；羅格列酮組脂聯(lián)素及TFIMP2的表達(dá)量較其他三組明顯升高(P<0.01)；3、RT-PCR結(jié)果顯示羅格列酮組脂聯(lián)素、PPARγ mRNA的表達(dá)較羅格列酮+GW9662

4、組、GW9662組、空白對(duì)照組明顯升高(P<0.01)；且脂聯(lián)素和PPARγmRNA表達(dá)存在顯著相關(guān)關(guān)系(相關(guān)指數(shù)為0.970，P=0.000，P<0.01)。4、Western blot結(jié)果顯示羅格列酮組脂聯(lián)素、PPARγ蛋白的含量顯著高于羅格列酮+GW9662組、GW9662組及空白對(duì)照組(P<0.01)；且脂聯(lián)素和PPARγ，蛋白表達(dá)存在顯著相關(guān)關(guān)系(相關(guān)指數(shù)為0.966，P=0.001，P<0.01)。
　　 結(jié)論：PP