槲皮素抗小鼠肝纖維化研究.pdf

1、目的：肝纖維化是慢性肝炎和慢性肝損傷的共同特征，并導(dǎo)致肝硬化，其特征為細胞外基質(zhì)的增加，到目前為止，仍缺乏有效的治療策略。自身免疫反應(yīng)在肝纖維化過程中發(fā)揮了重要的作用。槲皮素(Quercetin，3,3，4，5,7-pentahydroxy navone)是廣泛存在于蔬菜和水果的異黃酮類植物雌激素，槲皮素具有潛在抑制炎癥的作用，并在一些體內(nèi)體外實驗中得到了驗證。但是由于槲皮素難溶于水，血漿半衰期短，注射劑量大，因此在本研究中，利用PEG

2、-PE脂質(zhì)體包裹槲皮素以增加水溶性和延長血漿循環(huán)時間。本研究通過反復(fù)注射刀豆蛋白A(Con A)建立肝纖維化模型，利用PEG-PE脂質(zhì)體槲皮素治療，觀察其療效，探討PEG-PE脂質(zhì)體槲皮素的潛在臨床應(yīng)用。同時檢測NF-кB與TGF-β1這兩種重要的纖維化相關(guān)基因的表達水平，探討其抗肝纖維化的機制。 方法：經(jīng)尾靜脈以每只小鼠12.5 mg/kg注射6次，每周一次以構(gòu)建肝纖維化模型。小鼠每日經(jīng)尾靜脈以0.5 mg/kg注射PEG-P

3、E脂質(zhì)體槲皮素。第6次Con A注射后1周處死小鼠，通過肝組織病理切片H&E染色和MassonTrichrome染色評價肝臟組織改變和膠原蛋白生成。同時利用免疫組化和real-time RT-PCR檢測小鼠肝臟NF-кB與TGF-β1的表達。 結(jié)果：H&E染色結(jié)果顯示，PEG-PE脂質(zhì)體槲皮素抑制了淋巴細胞浸潤、肝成纖維細胞增生和纖維條索形成。Masson Trichrome染色結(jié)果顯示，PEG-PE脂質(zhì)體槲皮素抑制膠原纖維的生

4、成，組織學(xué)定量分析光綠染色區(qū)域提示Con A對照組和空白脂質(zhì)體組小鼠肝臟膠原蛋白生成分別為7.36％和8.13％，PEG-PE脂質(zhì)體槲皮素組膠原蛋白生成為1.75％(P<0.001)。另外，免疫組化發(fā)現(xiàn)PEG-PE脂質(zhì)體槲皮素組NF-кB陽性細胞較Con A對照組和空白脂質(zhì)體對照組顯著減少，Real-time RT-PCR檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)PEG．PE脂質(zhì)體槲皮素治療后小鼠肝組織中的NF-кB與TGF-β1的mRNA水平較Con A對照組低。