負(fù)載肝癌細(xì)胞裂解物樹突狀細(xì)胞β-中心體肌動(dòng)蛋白表達(dá)下調(diào)與肝癌免疫逃逸的關(guān)系.pdf

1、Y769982復(fù)旦大學(xué)博士研究生學(xué)位論文負(fù)載肝癌知恿曩解柏樹突狀細(xì)胞t3中心體肌動(dòng)蛋白表逮下調(diào)與肝癌免疫逃逸的關(guān)系TherelationbetweendownregulationofBcentractinexpressionind洲ticcellspulsedwithhepatocellularcareinoma(HCc：|)lysatesandHCCimmuneescape博士麟巍生：翁永強(qiáng)學(xué)科、專業(yè)：外科學(xué)(肝外科)導(dǎo)師：湯釗猷院士

2、導(dǎo)師小組成員：邱雙健副教授劉銀坤教授復(fù)旦中山肝癌研究所二零零五年四月蓑埝摹勃基’蠹懟固憨中文摘要第一部分乙肝相關(guān)肝癌外周血樹突狀細(xì)胞負(fù)載腫瘤細(xì)胞裂解物前后免疫功能的變化目的：評估有乙型肝炎背景肝癌患者外周血單個(gè)核細(xì)胞來源樹突狀細(xì)胞表面分子表達(dá)及負(fù)載腫瘤抗原|ii『后的免疫功能，探討乙肝(黜v)相關(guān)肝癌患者因感染HBV導(dǎo)致免疫微環(huán)境改變對DC功能的影響，以及與免疫逃逸的關(guān)系。方法：分離18例乙肝相關(guān)原發(fā)性肝癌、ll例乙肝肝硬化患者和10例

3、健康獻(xiàn)血者外周血單個(gè)核細(xì)胞，體外培養(yǎng)加入重組入粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子和IL4誘導(dǎo)生成DO，以共聚焦顯微鏡和掃描電鏡觀察形態(tài)，以流式細(xì)胞儀檢測DC表面HLADR、CDla、CDS0、CD83、CD86等分子表達(dá)水平，以高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞株HCCLM6制備的細(xì)胞裂解物分別負(fù)載肝癌、肝硬化和正常人來源的DC，最后以混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)鍘定DC負(fù)載前后刺激同種異型T淋巴細(xì)胞增殖能力，并測定MLR上清中IL12的含量。結(jié)果；正常組、肝硬化

4、組和肝癌組DC的形態(tài)之聞并無明顯差異，但肝硬化組和肝癌組HLADR、CDla、CD80和CD86等分子表達(dá)水平低于正常組(／7005)；負(fù)載腫瘤裂解物前肝硬化和肝癌組刺激同種異型T淋巴細(xì)胞增殖能力和MLR上清中IL12含量明顯低于正常組，負(fù)載腫瘤抗原后三組均有顯著提高，并以肝硬化組提高最為明顯，但I(xiàn)L12含量仍低予正常組。結(jié)論t乙肝相關(guān)的肝硬化積肝癌患者因感染HBV導(dǎo)致免疫微環(huán)境改變對DC表型和功能有抑制作用，是導(dǎo)致肝癌免疫逃逸的重要機(jī)

5、制；負(fù)載腫瘤裂解物可減輕免疫逃逸程度，但相比正常人DC，肝細(xì)胞癌患者DC體外負(fù)載腫瘤裂解物后仍存在表型和功能的缺陷，可能無法進(jìn)行有效的腫瘤免疫治療；肝硬化患者DC仍有一定功能，可能是其尚未發(fā)展成肝癌的一個(gè)原因。第二部分樹突狀細(xì)胞負(fù)載不同轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細(xì)胞裂解物的蛋白質(zhì)譜變化目的：了解負(fù)載不同轉(zhuǎn)移潛能肝癌細(xì)胞裂解物和正常肝細(xì)胞裂解物后樹突狀細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)譜的差異。方法：以不同轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細(xì)胞株(HCCLM6高轉(zhuǎn)移、MHCC97L低轉(zhuǎn)移、