準(zhǔn)分子激光屈光手術(shù)后干眼癥發(fā)病的分子和解剖學(xué)機(jī)制研究.pdf

1、第一部分、LASIK兔眼動(dòng)物模型手術(shù)前后透射電鏡和掃描電鏡研究。 目的：通過(guò)對(duì)兔眼LASIK手術(shù)前后角膜進(jìn)行透射電鏡和掃描電鏡觀察，探討角膜上皮超微結(jié)構(gòu)的變化對(duì)淚膜的影響及與術(shù)后干眼癥的關(guān)系。 方法：新西蘭白兔24只，對(duì)每只其中一只眼分別進(jìn)行常規(guī)LASIK手術(shù)，后分別在術(shù)后1天、術(shù)后1周、術(shù)后2周、術(shù)后1月、術(shù)后3月、術(shù)后6月各取4只白兔沿角鞏膜緣剪下角膜，放入PH7.4的PBS液中固定，送至電鏡室做透射電鏡和掃描電鏡的

2、檢查。 結(jié)果：通過(guò)透射電鏡研究發(fā)現(xiàn)：手術(shù)后的兔眼角膜表面的超微結(jié)構(gòu)在早期改變較明顯，微絨毛明顯減少、排列不規(guī)則，空泡現(xiàn)象明顯。到手術(shù)后三個(gè)月左右后基本恢復(fù)，微絨毛基本恢復(fù)正常排列，上皮細(xì)胞內(nèi)無(wú)空泡變性。通過(guò)掃描電鏡研究發(fā)現(xiàn)：手術(shù)后早期角膜上皮表面的微絨毛明顯排列不規(guī)則，微絨毛數(shù)量減少，有水腫和斷裂的跡象，隨著時(shí)間的推移，這些現(xiàn)象逐漸好轉(zhuǎn)，在術(shù)后一個(gè)月左右基本恢復(fù)正常。微絨毛排列整齊，且濃密，無(wú)水腫斷裂。 結(jié)論：眼表結(jié)構(gòu)的

3、完整性和規(guī)則性是保證淚膜穩(wěn)定的重要因素，由此可見(jiàn)，角膜上皮的缺損和不規(guī)則性，是造成LASIK術(shù)后干眼癥的重要原因之一。 第二部分、LASIK兔眼動(dòng)物模型手術(shù)前后角膜神經(jīng)染色研究。 目的：以兔眼作為L(zhǎng)ASIK手術(shù)模型對(duì)其手術(shù)前后不同時(shí)間點(diǎn)角膜神經(jīng)進(jìn)行染色，探討手術(shù)前后角膜感覺(jué)神經(jīng)的切斷和愈合過(guò)程及對(duì)淚膜動(dòng)力學(xué)的影響。 方法：新西蘭白兔24只，對(duì)每只其中一只眼分別進(jìn)行常規(guī)LASIK手術(shù)，后分別在術(shù)后1天、術(shù)后1周、術(shù)

4、后2周、術(shù)后1月、術(shù)后3月、術(shù)后6月各取4只白兔沿角鞏膜緣剪下角膜并作角膜神經(jīng)染色。 結(jié)果：術(shù)后1天，角膜激光切削區(qū)內(nèi)上皮下神經(jīng)叢消失，未切削區(qū)上皮下神經(jīng)叢形態(tài)正常，神經(jīng)損傷邊界清楚，神經(jīng)纖維被截?cái)?。術(shù)后3天及術(shù)后半月可見(jiàn)僅角膜瓣蒂部的上皮、上皮下和基質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)神經(jīng)纖維的分布，術(shù)后半月在高倍鏡下可見(jiàn)有細(xì)小的神經(jīng)纖維從主干上再生。至術(shù)后一個(gè)月即可明顯看到神經(jīng)長(zhǎng)入切斷的角膜瓣內(nèi)。術(shù)后6個(gè)月，在激光消融區(qū)中心可見(jiàn)上皮下神經(jīng)纖維。神經(jīng)纖維

5、的再生是由切斷的神經(jīng)干從角膜瓣邊緣向中心再生的。 結(jié)論：LASIK術(shù)后角膜神經(jīng)的修復(fù)是一個(gè)長(zhǎng)期、波動(dòng)的過(guò)程，角膜神經(jīng)的修復(fù)對(duì)角膜整體結(jié)構(gòu)和功能的恢復(fù)十分關(guān)鍵。只有更好地理解LASIK術(shù)后角膜的愈合反應(yīng)及其相關(guān)機(jī)制，尋找促進(jìn)角膜神經(jīng)修復(fù)的途徑，調(diào)控角膜的傷口愈合，才能加快角膜敏感度的恢復(fù)，減少干眼癥的發(fā)生，進(jìn)一步完善激光屈光手術(shù)，獲得長(zhǎng)期的最佳視覺(jué)效果。 第三部分、LASIK手術(shù)前后淚液中TNF、IL-2、NGF變化以及參

6、與 LASIK術(shù)后干眼癥的形成機(jī)制的研究。 目的：對(duì)LASIK手術(shù)前后患者淚液中TNF(tumor necrosis factor腫瘤壞死因子,簡(jiǎn)稱(chēng)TNF)和IL-2(interleusis 2白細(xì)胞介素-2,簡(jiǎn)稱(chēng)IL-2)的變化進(jìn)行測(cè)定，探討其于術(shù)后干眼癥發(fā)生的關(guān)系，同時(shí)對(duì)NGF(nerve growth factor 神經(jīng)生長(zhǎng)因子，簡(jiǎn)稱(chēng)NGF)也進(jìn)行測(cè)定，觀察其與角膜感覺(jué)神經(jīng)愈合角膜感覺(jué)恢復(fù)的關(guān)系。 方法：隨機(jī)選取2

7、006年5月至2006年7月至本院眼科中心接受LASIK治療的患者57例，共114只眼。分別在術(shù)前、術(shù)后1天、術(shù)后1周、術(shù)后1月、術(shù)后3月收集患者淚液。并用ELISA法測(cè)定。 結(jié)果：LASIK術(shù)前至術(shù)后3月的隨訪期間內(nèi)，未檢測(cè)到淚液中TNF含量有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的變化（P）0.05），LASIK術(shù)后一天、一周、一月淚液中的IL-2含量較術(shù)前減少（P<0.05）,術(shù)后3月與術(shù)前無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P）0.05）。而LASIK術(shù)后一天、一周、一

8、月、三月淚液中的NGF含量均較術(shù)前提高（P<0.05），其中術(shù)后一天就達(dá)高峰，后逐漸減少但均較術(shù)前有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)論：在本研究中發(fā)現(xiàn)LASIK術(shù)后淚液中的TNF沒(méi)有明顯變化，而IL-2低于術(shù)前,NGF高于術(shù)前，由此可見(jiàn)，細(xì)胞因子是一個(gè)錯(cuò)綜復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)，它們互相影響，互相制約，又有各自的作用方式，對(duì)LASIK術(shù)后角膜炎性反應(yīng)，神經(jīng)修復(fù)，感覺(jué)恢復(fù)及術(shù)后干眼的產(chǎn)生有不同的影響。 本實(shí)驗(yàn)只是一個(gè)初步的研究，它們的具體的作用機(jī)制和