北冬蟲夏草液體培養(yǎng)條件的優(yōu)化與誘變育種.pdf

1、北冬蟲夏草屬于麥角菌科蟲草屬，與冬蟲夏草同屬，異種，它生長在中山區(qū)或淺山區(qū)，能夠在多種昆蟲的蛹上寄生。北冬蟲夏草對于生長環(huán)境的要求較低，液體發(fā)酵可形成菌絲體，人工大規(guī)模固體培養(yǎng)可獲得子座，藥用價值與馳名中外的冬蟲夏草相似。北冬蟲夏草的成分如蟲草多糖和蟲草酸，與天然冬蟲夏草的含量相當，有些成分的含量甚至超過天然冬蟲夏草，如蟲草素的含量是天然冬蟲夏草的35倍[2]。其有效活性成分蟲草多糖(CMPS)被認為是非特異性免疫調(diào)節(jié)劑，可激活肌體的免

2、疫活性細胞,為我國名貴的藥用真菌。但北冬蟲夏草野生資源少，極大的限制了它的應用，而人工培養(yǎng)可彌補此點，特別是液體發(fā)酵可使北冬蟲夏草的應用成為可能。目前人工栽培獲得成功并開發(fā)了系列產(chǎn)品，為滋補保健食品、功能食品和藥源開辟了新的途徑，隨著科技進步，其栽培、應用前景十分廣闊。 本研究對北冬蟲夏草子實體進行組織分離，制備菌種，以此作為出發(fā)菌株，利用紫外線、微波及其二者結合分別對出發(fā)菌株進行誘變的研究，探討了處理劑量、時間等因素對誘變結果

3、的影響。經(jīng)三種誘變方法的誘變，并以其多糖含量和生物量為試驗指標，進行測量。同時對其進行遺傳穩(wěn)定性試驗，結果表明該菌株的多糖生產(chǎn)能力比較穩(wěn)定，經(jīng)2次傳代，其生物性能穩(wěn)定。對原菌株進行液體培養(yǎng)條件研究，獲得了一個最佳搖瓶培養(yǎng)條件為：蛋白胨1.5％，蔗糖2％，KH2PO40.1％，MgSO40.1％，溫度20℃，pH7，轉速為170r/min，發(fā)酵時間5d。，在此條件下對對照菌株和誘變菌株進行了培養(yǎng)，對照菌株蟲草多糖含量為28.9692mg，

4、誘變菌株蟲草多糖含量為 30.4243 mg，誘變菌株比對照菌株高5％。同時對對照菌株和誘變菌株進行了固體培養(yǎng)，對其蟲草多糖含量進行了測定，對照菌株多糖含量為2.7955mg/g培養(yǎng)基，誘變菌株3.2713 mg/g 培養(yǎng)基，誘變菌株比對照菌株高17％ 。在此培養(yǎng)條件下誘變菌株多糖含量顯著提高，有一定的應用價值。 本研究的創(chuàng)新點在于：首次嘗試應用北冬蟲夏草菌絲體片段進行物理誘變育種，包括紫外線誘變和微波誘變，以及紫外和微波的復合