一株產靈菌紅素的沙雷氏菌誘變育種和發(fā)酵條件優(yōu)化的研究.pdf

1、本文以本實驗室保存的一株產靈菌紅素的粘質沙雷氏菌RZ21 為出發(fā)菌株，對其菌株復壯、原生質體誘變、發(fā)酵條件優(yōu)化、色素提取和生物防治等方面作了初步的研究。
　　 為提高RZ21 產靈菌紅素的能力，對RZ21菌進行了原生質體的紫外誘變育種。通過紫外誘變原生質體、鏈霉素抗性平板初篩、搖瓶發(fā)酵復篩得到一株靈菌紅素高產株RZ21-3，其靈菌紅素產量達到了0.813g/L，比野生型的RZ21 提高了24.9％，而且突變株的靈菌紅素生產能力遺

2、傳穩(wěn)定性較好。
　　 為進一步提高RZ21-3 產靈菌紅素能力，對RZ21-3 培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件進行了優(yōu)化。通過單因子試驗和正交試驗得出RZ21-3 發(fā)酵產靈菌紅素的最佳培養(yǎng)基配比為：黃豆粉0.5％、酪素1％、蠶蛹粉1％、K2HPO4 0.2％、NaCl 0.5％。最佳培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度28 ℃、裝液量250mL 三角瓶30mL、轉速150rpm、初始pH7.5、接種量2％。在上述條件下，靈菌紅素產量達2.64g/L。

3、　　 通過提取、柱層析及TLC 分離純化RZ21-3 產生的色素，并通過紫外全波長掃描、質譜、核磁對色素進行結構鑒定，確定該紅色素為靈菌紅素。
　　 粘質沙雷氏菌是昆蟲的一種病原菌，能感染許多昆蟲的成蟲和幼蟲。家蠶（Bombyx mori. L）是一種鱗翅目昆蟲的幼蟲，通過RZ21菌對家蠶的毒力試驗，發(fā)現(xiàn)該菌對家蠶表現(xiàn)出明顯的毒殺效果，口服感染48h 后毒力回歸方程為y=1.5271x+1.8908，致死中濃度為1.09×10