聚乙二醇化重組人生長(zhǎng)激素的免疫原性、生物活性及藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、目的：分析單甲氧基聚乙二醇丙醛(mPEG-ALD，20kD)化重組人生長(zhǎng)激素(PEG<,20kD>-GH)的免疫原性及生物活性，并進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)研究。 方法：用單聚PEG<,20kD>-GH免疫家兔，檢測(cè)血清中抗體滴度，與重組人生長(zhǎng)激素(rhGH)比較免疫原性；利用未成年去垂體大鼠體重增加法檢測(cè)單聚PEG<,20kD>-GH的在體生物活性；建立雙抗夾心ELISA法檢測(cè)單聚PEG<,20kD>-GH；家兔分別單次皮下注射單聚PEG

2、<,20kD>-GH、PEG<,5kD>-GH、rhGH，比較三者的藥代動(dòng)力學(xué)差異；小鼠分別單次皮下注射高、中、低三個(gè)濃度單聚PEG<,20kD>-GH，單次靜脈注射中劑量單聚PEG20KD-GH,單次皮下注射中劑量rhGH，比較各組之間藥代動(dòng)力學(xué)的差異。 結(jié)果：與rhGH、PEG<,5kD>-GH相比，單聚PEG<,20KD>-GH明顯降低了抗體滴度，縮短了抗體持續(xù)時(shí)間，降低了免疫原性；在體活性測(cè)定表明單聚PEG<,20KD>

3、-GH的體內(nèi)作用時(shí)間更長(zhǎng)，其一次給藥比每天給藥的rhGH更有效；在家兔體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)中，sc單次單聚PEG<,20kD>-GH，其t<,1/2β>為19.40±2.07h，AUC 為5269.13±433.65h·ng/ml，CL為0.07±0.01L/h，與rhGH組、PEG<,5kD>-GH組相比均有顯著差異(p<0.05)；在小鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)中，sc 低、中、高PEG<,20KD>-GH三劑量組，Cmax分別為910.15±77.7ng

4、/ml、1916.54±117.1977.7ng/ml、2702.46±116.41ng/ml，t<,1/2β>分別為18.29±3.29h、17.37±2.56h、16.21±0.64h，AUC分別為17013.6±2605.8h·ng/ml、35466.4±4218.4h·ng/ml、52261.1±6948.9 h·ng/ml，比值約為1:2.3:3.4，與劑量比接近，單次 iv 中劑量PEG<,20KD>-GH，AUC 為422

5、61.5±3754.9h.ng/ml，CL 為0.00048±3.85E-05L/h，t<,1/2β>為14.61±0.62h，單次 sc 中劑量組rhGH，t<,1/2β>為3.35±0.88h，CL 為0.00536±0.00059L/h，AUC為3738.7±320.9h·ng/ml。 結(jié)論：分析了單聚PEG<,20KD>-GH 的免疫原性及生物活性，并對(duì)其藥代動(dòng)力學(xué)進(jìn)行研究，為研制具有長(zhǎng)效作用的聚乙二醇化重組人生長(zhǎng)激素提