腺病毒介導(dǎo)的內(nèi)皮型一氧化氮合酶基因轉(zhuǎn)移防治移植血管狹窄的實驗研究.pdf

1、該文由三篇論文組成.一、攜帶內(nèi)皮型一氧化氮合酶基因的重組腺病毒載體的構(gòu)建及鑒定.目的:該實驗的目的為能夠?qū)NOS基因高效、穩(wěn)定、安全的轉(zhuǎn)移至血管壁細胞,而構(gòu)建帶有eNOS基因的復(fù)制所陷型重組腺病毒載體.目前,國內(nèi)尚未見帶有eNOS基因的重組腺病毒載體構(gòu)建的報道.結(jié)論:采用磷酸鈣-DNA沉淀法將重組質(zhì)粒pCA14-CMV-eNOS和腺病毒拯救質(zhì)粒pBHG10共轉(zhuǎn)染293細胞,通過同源重組,生成帶有eNOS基因的復(fù)制缺陷型重組腺病毒載體.

2、經(jīng)形態(tài)學(xué)、病毒DNA酶切、PCR和RT-PCR等方法鑒定,證實所構(gòu)建的正確性.為血管疾病的基因治療打下基礎(chǔ).二、腺病毒介導(dǎo)的eNOS基因轉(zhuǎn)移對血管平滑肌細胞增殖的抑制作用.目的:是用腺病毒介導(dǎo)eNOS基因轉(zhuǎn)移至體外培養(yǎng)的VSMC中,觀察其對VSMC增殖的抑制作用,以探討冠狀動脈旁路移植術(shù)后血管再狹窄的基因治療可行性.結(jié)論:腺病毒介導(dǎo)的eNOS工因可以在VSMC中高效的轉(zhuǎn)染表達,并對VSMC的增殖有明顯的抑制作用.該實驗結(jié)果提示:抑制VS

3、MC增殖主要是通過對細胞增殖周期阻滯實現(xiàn)的,而不是誘導(dǎo)細胞凋亡.目前,國內(nèi)尚未見有關(guān)eNOS基因轉(zhuǎn)移抑制VSMC增殖的研究報告.三、腺病毒介導(dǎo)的eNOS基因局部轉(zhuǎn)移對移植血管內(nèi)膜增生的抑制作用.目的:在動脈"搭橋"的動物實驗?zāi)Ｐ椭?通過腺病毒載體將eNOS基因轉(zhuǎn)入到靜脈橋中,觀察其在靜脈橋中的表達和對新生內(nèi)膜增生的抑制作用,探討eNOS基因轉(zhuǎn)移對血管橋再狹窄的防治作用.經(jīng)檢索國內(nèi)外尚無類似研究報告.結(jié)論:腺病毒介導(dǎo)的eNOS基因能夠有效