堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）siRNA表達質粒治療膠質瘤的體外實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：研究堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)小分子干擾RNA(siRNA)表達質粒對膠質瘤細胞系U251的抑制作用。 方法：用優(yōu)選靶序列siRNA 850構建siRNA表達質粒pGPU6/GFP/Neo-shFGF2，然后采用脂質體介導的方法轉染入高表達bFGF的膠質瘤細胞系U251細胞內。根據綠色熒光蛋白表達情況檢測轉染效果，同時應用MTT法觀察轉染細胞的增殖活性的變化，以尋找最佳轉染條件。應用RT-PCR法檢測轉染細胞mRN

2、A表達的變化。用Annexin V-FITC/PI雙色標記的流式細胞儀法檢測轉染細胞的凋亡狀態(tài)。 結果：綠色熒光蛋白表達情況表明：siRNA表達質?？赏ㄟ^脂質體介導作用成功轉染入膠質瘤細胞系U251細胞內。MTT結果顯示：MTT吸收值在轉染后48小時和72小時下降，與正常對照組和陰性對照組相比都具有統計學意義。RT-PCR結果顯示：轉染了不同濃度siRNA表達質粒的細胞mRNA表達均受抑制。流式細胞分析結果表明：實驗組在轉染后4

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